產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3289 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽病毒株PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)RTPCR | BKP3289 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:禽病毒株PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Tofacitinib 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 度:98.0% 小鼠病毒(PVM)ELISA試劑盒
Fosaprepitant dimeglumine 中文名: 分子式:C30H40F7N6O10P 度:98.0% 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
Pazopanib 中文名:帕唑帕尼 分子式:C21H23N7O2S 度:98.0% 小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒
Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate 中文名:卡培他濱 分子式:C16H20FN3O7 度:98.0% 小鼠防御素A2 英文名稱: Mouse Defensins A2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DA2
Irbesartan 中文名:厄貝沙坦 分子式:C25H28N6O 度:98.0% 小鼠內(nèi) 英文名稱: Mouse Endotoxin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EDT
(2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 90695-03-7 中文名: 分子式:C30H50O HumanPlasmafibronectin,pFNELISAKit人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Solanesol 13190-97-1 中文名:茄尼醇 分子式:C45H74O 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 109837-85-6 中文名: 分子式:C19H34O3 Human plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138195-49-0 中文名: 分子式:C29H36O17 Humancarbonicanhydrase,CAELISAKit 人酶(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
Mumeose K 2132384-01-9 中文名: 分子式:C25H32O15 HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽病毒株PCR檢測(cè)試劑盒直銷胰島素樣生長因子I(57-70) Insulin-like Growth Factor I (57-70) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA試劑盒豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
胰島素樣生長因子Ⅱ(69-84) Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒 ,英文名: SP-C ELISA Kit
白介素-1β轉(zhuǎn)化酶底物 Interleukin-1β Convertase Substrate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatLactoferrin,LTF/LFELISAkit 96T/48T
下鈣素 Katacalcin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素22(IL-22)試劑盒 Human Ierleukin 22,IL-22 ELISA KIT
肯普肽 Kemptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱MouseansferrieceptorELISAKit小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格:96T/48T
運(yùn)動(dòng)升壓素 Kinetensin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR PDGF-A蛋白共沉淀分析試劑盒5
層粘連蛋白(925-933) Laminin (925-933) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA試劑盒豬可溶性內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
層粘連蛋白(929-933) Laminin (929-933) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒 ,英文名: SP-B ELISA Kit
層粘連蛋白九肽,酰胺 Laminin Nonapeptide, Amide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA檢測(cè)試劑盒RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 96T/48T
白細(xì)胞焦激肽(4-8);Pheromonotropic五肽 Leucopyrokinin (4-8);Pheromonotropic Pentapeptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素-21(IL-21)試劑盒 Human IL-21 ELISA Kit
L-山梨糖(標(biāo)準(zhǔn)品) L-(-)-Sorbose 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人5羥二十碳四烯酸(5-HETE)試劑盒 Human 5-hydroxyeicosateaenoic acid,5-HETE ELISA Kit
糖精鈉 水合物(標(biāo)準(zhǔn)品) Saccharin salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T
標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05000mol/L(0.1N)) Iodine solution 質(zhì)量規(guī)格:0.05000mol/L(0.1N) 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)試劑盒 Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA Kit
標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水) Iodine solution 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水 人5羥色胺(5-HT)試劑盒 Human 5-Hydroxyyptamine,5HT ELISA Kit
鈧標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3) Scandium standard 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3 人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgA)試劑盒 Human 5HT IgA ELISA Kit
反式丁烯醛(standard for GC) (E)-2-Butenal 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC 人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgG)試劑盒 Human 5HT IgG ELISA Kit
十二烷(Standard for GC,≥99.5% (GC)) Dodecane 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC) 人5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgM)試劑盒 Human 5-hydroxyyptamine/serotonin(5HT/ST)aibody(IgM)ELISA kit
正癸酸(Standard for GC,>99%(GC)) Decanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC) 人5-羥色胺受體6(H6)試劑盒 Human H6 ELISA Kit
己二酸二甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Dimethyl adipate 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測(cè)試劑盒Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 96T/48T
馬來酸二丁酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Dibutyl maleate 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC) 人60S核糖體蛋白L17(RPL17)試劑盒 Human RPL17 ELISA kit