產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3211 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鮑癥病毒PCR檢測試劑盒價格 | Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR | BKP3211 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:鮑癥病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
萊氏無膽甾原體PCR檢測試劑盒 Acholeplasma laidlawii PCR
無色桿菌屬通用PCR檢測試劑盒 Achromobacter spp.PCR
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不動桿菌屬通用PCR檢測試劑盒 Acinetobacter spp.PCR
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白樂杰馬杜拉放線菌PCR檢測試劑盒 Actinomadura pelletieriPCR
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戈氏放線菌PCR檢測試劑盒 Actinomyces gerencseriaePCR
衣氏放線菌PCR檢測試劑盒 Actinomyces israeliiPCR
內(nèi)氏放線菌PCR檢測試劑盒 Actinomyces naeslundiiPCR
化膿放線菌PCR檢測試劑盒 Actinomyces pyogenesPCR
放線菌屬通用PCR檢測試劑盒 Actinomyces spp.PCR
腺伴隨病毒PCR檢測試劑盒 Adenoassociated Virus(AAV)PCR
腺病毒型PCR檢測試劑盒 Adenovirus(AV)APCR
腺病毒通用PCR檢測試劑盒 Adenovirus(AV)PCR
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斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒 Aeromonas punctataPCR
滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒 Aeromonas salmonicidaPCR
溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒 Aeromonas sobriaPCR
氣單胞菌通用PCR檢測試劑盒 Aeromonas spp.PCR
蜂房小甲蟲PCR檢測試劑盒 Aethina tumidaPCR
阿菲波菌屬通用PCR檢測試劑盒 Afipia spp.PCR
非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒 African Horse Sickness Virus(AHSV)RTPCR
非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒 African Swine Fever Virus(ASFV)PCR
放線共生放線桿菌PCR檢測試劑盒 Aggregatibacter actinomycetemcomitans PCR
加州立克次體PCR檢測試劑盒 Ajellomyces capsulate PCR
牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒 Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR
類天花病毒PCR檢測試劑盒 Alastrim VirusPCR
糞產(chǎn)堿桿菌PCR檢測試劑盒 Alcaligenes faecalisPCR
11狷羚病毒1型PCR檢測試劑盒 Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV11PCR
阿留申病病毒PCR檢測試劑盒 Aleutian Disease Virus(ADV)PCR
奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒 Allpaahuayo virus(ALLV)RTPCR
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交鏈孢霉屬通用PCR檢測試劑盒 Alternaria spp.PCR
阿馬帕里病毒PCR檢測試劑盒 Amapari virus(AMAV)RTPCR
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十二指腸鉤口線蟲PCR檢測試劑盒 Ancylostoma duodenalePCR
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