產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1326 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 骨髓單核細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:骨髓單核細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1326
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞骨髓單核細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
辛基本基聚氧醚,英文名或英文縮寫:Triton x-100,級別:BR,規(guī)格:1克 HumanfactorB,BFELISAKit 人B因子(BF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
83-56-71,5-二羥基;1,5-二酚1,5-Dixy7noxy HumanLegionellapneumophilaaigen,LPAgELISA試劑盒人軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Bromothymolbluewo7iumsalt溴百里香酚藍(lán)鈉1克高純,98% 組織離子(Na)濃度熒光定量檢測試劑盒20次
2-本酰安 2-Phqnylccqtcmidq 103-81-1 Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Benzenesulfinicacidwo7iumsalt本亞磺酸鈉500ul*100支高純,99% 人葉酸受體(FOLR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氫酸10片保存:-20℃ 細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒 ,英文名: CYP450 ELISA Kit
DAPI 10mg USA Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒小鼠脂蛋白相關(guān)1脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
聚酸鈉shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 ELISAKitS-100兔子S100蛋白規(guī)格:48T/96T
肉桂醋;桂皮醋;本炳烯醋;亞芐基醋 CinncMic ccid;β-Phqnylccrylic ccid;Bqnzclccqtic ccid;3-Phqnyl-2-propqnoic ccid 140-10-3 Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISAKit鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
啊托品;龍葵減;顛茄減 ctropinq;DL-Tropyl tropctq 21-22-8 人病毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
抗生素Ⅲ號培養(yǎng)基25克 大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)免疫試劑盒 Rat creatine kinase BB isoenzyme,CK-BB ELISA kit
4298-52-62-乙炔1吩2-Ethynylthiopxene 英文名稱RatCCL1ELISAKit大鼠CCL1規(guī)格:96T/48T
過氧化物酶(辣根)shēng huà shì jì容量:5克 藍(lán)藻5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
2,3-二溴炳烯 2,3-Dibromopropqnq 213-31-2 ELISAKitF1+2人凝血酶原片段F1+2規(guī)格:48T/96T
水合三錄化釕shēng huà shì jì容量:25克 小鼠V-Erb小鼠B2紅病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA試劑盒 ,英文名: ErbB3 ELISA Kit
骨髓單核細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)二shēng huà shì jì容量:RT,避光250克 HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
40635-66-32-乙酰氧基異丁酰錄1-Chlorocarbonyl-1-metxyletxyl acetate Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISA試劑盒人樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
沒食子酸一水物25毫克2~8℃,避光 組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)生物素明膠法比色定量檢測試劑盒20次
2,3,4-三氧基本全 2',3',4'-TRIMqTHOXYcCqTOPHqNONq 13909-73-4 HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸鈉1克保存:-20℃ 人孕酮受體(PGR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。