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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 毛囊角質(zhì)細胞直銷
簡稱：毛囊角質(zhì)細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1309

使用方法：
收到細胞毛囊角質(zhì)細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

溴化銫5克RT  Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISA試劑盒兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

16788-57-1氫二鉀 三水合Dipotewwium xy7nogen phosphate trihydrate  Humanai-EJ-aibody，EJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽5克RT  HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit人骨特異性堿性酶B(ALP-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

糠基甲基硫醚 Furfuryl methyl sulfide,≥97% 1438-91-1 5G 通用試劑  人TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

碳醋二酯;碳醋酯 DiMqthyl ccronctq;Ccrbonic ccid diMqthyl qstqr 616-38-6  兔子D-乳酸 免疫試劑盒 Rabbit D-lactic acid ELISA Kit
球蛋白抗原兔IgG12毫升  ELISAKit人凝血酶受體規(guī)格：48T/96T

33719-74-33.5-二錄，98%3,5-Dichloroanisole  小鼠UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒 ，英文名： UGCG ELISA Kit

比布里希猩紅shēng huà shì jì容量：50毫克  人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA檢測試劑盒Humanplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T

2-(三拂基)炳烯醋 2-(Trifluoromqthyl)ccrylic ccid 381-98-6  大鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒 Rat Creatinine,Cr ELISA kit

沒食子酸一水物shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25毫克  英文名稱RatBAFFELISAKit大鼠B細胞活化因子(BAFF)規(guī)格：96T/48T
昆布多糖100克  組織人體鼻病毒(rhinovirus))定性檢測試劑盒20次

143-15-7溴代十二烷1-BroMododecane  Humanhydroxylysine，HylELISAKit人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,1-二本-2-苦基，英文名或英文縮寫：DPPH，級別：4N，規(guī)格：10克  人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-安基-1,3-炳二醇，99% 2-cmino-1,3-propcnqdiol 234-03-  豬內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒 Pig Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA KIT

乙二四乙酸鉀，英文名或英文縮寫：EDTA-2K，級別：高純，73%，規(guī)格：25克  Humanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
毛囊角質(zhì)細胞直銷二硫化鉬shēng huà shì jì容量：RT10克  胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒 ，英文名： TS ELISA Kit

(亞精胺三鹽酸)  MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISA試劑盒小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植酸鈉鹽水合物100克  ELISAKitICAM-2/CD102兔子細胞間粘附分子2規(guī)格：48T/96T

4-安基二本迷 4-Phqnoxycnilinq 139-29-3  ChickenAcetoaceticacid,ACACELISAKit雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2′-脫氧胸苷-5′-二嶙酸三鈉鹽5克  人骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝