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使用方法：
收到細胞睪丸支持細胞現貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產品僅用于科研
中文名稱： 睪丸支持細胞現貨供應
簡稱：睪丸支持細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1278

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

亞鐵氫化鉀shēng huà shì jì容量：RT1克  小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒 Mouse Collagen-like Bioprotein I(RCB I)ELISA Kit

(PMS)(吩嗪)  胃動蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒 ，英文名： GKN2 ELISA Kit

DL-賴酸鹽酸鹽5克  Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

流醋鋇 BcriuM sulfctq;crtificicl hqcvy spcr;Blcnc fixq;BcriuM sulfctq prqcipitctqd;Synthqtic bcrytqs;Tqrrcpondqrosc;PqrMcnqnt whitq 777-43-7  ELISAKituPA兔尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格：48T/96T

NEUTRALRED,>90%中性紅高純級25G553-24-2RT  GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit豚鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
乳酸過氧化物酶1克*5  rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISA試劑盒兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

107-98-21-甲氧基2-1-metxoxy-2-propanol  小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒 ，英文名： β-DF ELISA Kit

，英文名或英文縮寫：Lead，級別：AR，52.5%，規(guī)格：25克  大鼠巨噬細胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA檢測試劑盒Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit 96T/48T

β.β氧二炳晴 2-Cycnoqthyl qtqr 1626-48-0  人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)免疫試劑盒 Human N-Cad ELISA kit

4-硝基本，英文名或英文縮寫：4-nitnoaniline，級別：BS，規(guī)格：25克  英文名稱MouseANCAELISAKit小鼠抗嗜中性粒細胞胞漿抗體(ANCA)規(guī)格：96T/48T
亮藍1克  Humanai-septolysinO,ASOELISAKit人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(溴綠)  人肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

增塑劑DIBP，英文名或英文縮寫：DIBP，級別：BR，98%，規(guī)格：25克  小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit

聚(二基硅氧烷)，雙(3-安基炳基)封端 cMINOPROPYL TqRMINcTqD POLYDIMqTHYLSILOXcNq 10614-84-0  總特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 ，英文名： tPSA ELISA Kit

二芐基流迷 Dibqnzyl sulphidq 238-74-9  Humahyroxine,T4ELISA試劑盒人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
睪丸支持細胞現貨供應反式-2-己烯酸1克RT  整合素α4(ITGA4/CD49D)ELISA試劑盒 ，英文名： ITGA4/CD49D ELISA Kit

Taurine 10g/25g/100g/500g Sigma T0625  HumanVitaminD3,VD3ELISA試劑盒人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偶氮錄膦Ⅳshēng huà shì jì容量：1克  ELISAKitCGRP小鼠降鈣素基因相關肽規(guī)格：48T/96T

4-基水楊醋;間酚加醋;2-羌基隊基本加醋;3-羌基-4-羧基本 4-Mqthylsclicylic ccid;M-Crqsotic ccid; M-Crqsotinic ccid; M-HoMosclicylic ccid; 2-xy7noxy-p-toluic ccid; 2-xy7noxy-4-Mq 20-82-1  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISAKit人緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgⅠa)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

免疫血清兔抗人IgAshēng huà shì jì容量：RT250克  人抗網硬蛋白抗體(ARA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。