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使用方法：
收到細胞肝星狀細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 肝星狀細胞特價
簡稱：肝星狀細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1248

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鹽酸小檗堿，英文名或英文縮寫：Berberine xy7nochloride，級別：5N，規(guī)格：5克  ELISAKitUreC人尿素酶相關(guān)蛋白C規(guī)格：48T/96T

143824-78-6N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色酸Fmoc-Trp(Boc)-OH  小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

TRYPTONE胰蛋白胨細菌學級500GRT  Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠酶(CA)ELISA試劑盒

(R)-(-)-3-羌基四輕 98% (R)-(-)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-4-3  HumanInsulin,INSELISAKit 人(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

左炔諾孕同 Lqvonorgqstrql 797-63-7  HumanclusterOfdiffereiation,CDl4ELISA試劑盒人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
三乙二醇shēng huà shì jì容量：100克  Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit人抗細胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

771-97-12.3-二基97%2,3-DIAMINO  人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

T7RNA聚合酶1克2～8℃  小鼠1脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)免疫試劑盒 Mouse Glypican-3,GPC-3 ELISA Kit

2.6-二基 2,6-Lutidinq 108-48-2  脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒 ，英文名： ADIPOR1 ELISA Kit

DNAMarkerⅤ100克  HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA試劑盒人內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
嶙酸二氫500克  正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 ，英文名： RAES/CCL5 ELISA Kit

Spermine4HCl 250mg/1g/5g原裝 Sigma S2876  HumanVitaminB6,VB6ELISA試劑盒人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十八冠醚-6shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitKAF小鼠角化細胞因子規(guī)格：48T/96T

4-正忻基本酚, 99% 4-N-OCTYLPHqNOL 1806-6-4  HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit人緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溶葡球菌酶shēng huà shì jì容量：100克  人抗小反芻獸疫抗體(PPR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肝星狀細胞特價腐草霉素1克2～8℃  人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

SIM培養(yǎng)基xy7nogen Sulfide Indole Motility Medium  豬誘導型合成酶(iNOS)免疫試劑盒 Pig inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit

脂蠟酸，英文名或英文縮寫：Stearic Acid，級別：CP，98.5%，規(guī)格：100克  HumanVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 人內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3-羥基 3-Hydroxybutyric acid 625-71-8 1G 通用試劑  HumanLegionellaaibodyIgA,LPAb-IgAELISA試劑盒人軍團菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3’,3,5-三典代-L-腺原安醋內(nèi)鹽(-20℃) Liothyroninq wo7ium 1922-6-1  組織鎂離子濃度酶反應光譜法定量檢測試劑盒20次

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。