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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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肝外膽管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE1246
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE1246
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 肝外膽管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:肝外膽管上皮細(xì)胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE1246
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞肝外膽管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
鹽酸亞脲,英文名或英文縮寫:Guanidine xy7nochloride,級別:CP,97%,規(guī)格:500  組織毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒20

1076-97-71,4-環(huán)已二1,4-Cyclohexanedicarboxylic acid  HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKitN端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

3-PhosphoglycericPhosphokinase3-嶙酸甘油酸激酶25BR,1u/ul  兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/RLA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2--4-1坐啉-3- 95% 2-Mqthyl-4-Isothiczolin-3-onq 68-0-4  Rat platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒

2-AminoisobutyricAcidDL-α-基異5BR98%  HumanComplemefragme3c,C3cELISAKit 人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
三乙酸shēng huà shì jì容量:保存:-20100毫克  HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISA試劑盒人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2615-15-8六乙二醇Hexaetxylene glycol  HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit人衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

硅酯H-295shēng huà shì jì容量:500毫克  CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乙二醇丁醚 Ethylene glycol butyl ,99% 111-76-2 500ML 通用試劑  兔溶菌酶(LZM)免疫試劑盒 Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit

偶氮脒類引發(fā)劑V59/偶氮二異戊/2,2-偶氮(2-甲基丁)/2,2-偶氮--(2-甲基丁)/AMBN/VAZO67 高純,98%,及 100 國產(chǎn)/進(jìn)口  D2(PGD2)ELISA試劑盒 ,英文名: PGD2 ELISA Kit
嶙酸二氫錳shēng huà shì jì容量:RT10  ELISAKitH豬促甲狀腺素釋放激素規(guī)格:48T/96T

百里酚酞二鈉絡(luò)合指示劑NA  Humandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

25-ADP瓊脂糖凝膠4B5KU  人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

四乙二醇二對磺... Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate,97% 37860-51-8 10G 通用試劑  Human noradrenaline bitaas (NE-B) ELISA Kit 人重去甲(NE-B)ELISA試劑盒

乳糖醇 Lcctitol 8102/4/9  HumanBladdeumoraigen,BTAELISAKit 人抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
肝外膽管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)復(fù)達(dá)欣shēng huà shì jì容量:1  Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

10102-25-7litxium sulfate monohydrate  兔乙酰膽堿酯酶(AChE)免疫試劑盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit

硫代氧化型輔酶Ishēng huà shì jì容量:25  切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)ELISA試劑盒 ,英文名: ERCC1 ELISA Kit

1--4(氧基... 4-(Trifluoromethoxy)iodobenzene,97% 103962-05-6 1G 通用試劑  RabbitCrosslaps,CrELISA試劑盒兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

三氧化二銻 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA試劑盒人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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