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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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頸動脈成纖維細(xì)胞特價
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE1228
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE1228
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 頸動脈成纖維細(xì)胞特價
簡稱:頸動脈成纖維細(xì)胞

種屬:

來源:

培養(yǎng)基:

狀態(tài):

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE1228

使用方法:
收到細(xì)胞頸動脈成纖維細(xì)胞特價后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化鎵shēng huà shì jì容量:RT10  HumanLegionellaaibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit 人軍團(tuán)菌抗體IgM(LPAb-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(Horseradish)辣根過氧化物酶  Humangammaglamylanspeptidase,GGTELISA試劑盒人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

GENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技術(shù)級100MLCOLD  組織半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性比色法定量檢測試劑盒20

三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

ACRYL/BISSOLUTION酰胺/甲叉溶液500MLCOLD  兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
十八烷基基錄化10  病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(-PCR) 48T

98-71-5半水合 4-本酸聯(lián) , 98%4-Hydrazinobenzenesulfonic acid  humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISA試劑盒人1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙基紫疊鈉肉湯shēng huà shì jì容量:RT1  ELISAKitFSH豬促卵泡素規(guī)格:48T/96T

Pyrophosphoric acid,90% 2466-9-3 50G 通用試劑  HumandesminDesELISAKit人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

L-肌肽;L-肉縮安基醋;β-炳安酰-L-組安醋 L-Ccrnosinq;Ignotinq 302-84-0  人絲酸蛋白酶(PRSS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
硫化鎘shēng huà shì jì容量:RT10  大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sR)ELISA檢測試劑盒Ratsolubleierleukin-1receptor,IL-1sRELISAkit 96T/48T

(肌酸鈉L-免疫試劑盒 Human L-Adrenali ELISA kit

偶氮錄膦mN528  英文名稱MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit小鼠巨噬細(xì)胞克隆刺激因子(M-CSF)規(guī)格:96T/48T

啊錄米松雙炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13-  冰凍切片TUNEL熒光法(Fluorescein)測定試劑盒10

1.2-環(huán)氧環(huán) Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4  Rat1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA試劑盒大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
頸動脈成纖維細(xì)胞特價甘酸25RT  MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

629-03-81,6-二溴;溴化六亞甲基;六亞甲基二溴1,6-DibroMohexane;Hexametxylene broMide;Hexametxylene dibroMide  ELISAKitIFN-γ豚鼠γ干擾素規(guī)格:48T/96T

甘油單油酸酯,英文名或英文縮寫:Monoolein,級別:BR,32%,規(guī)格:1  Aflatoxin,AFTELISAKit霉毒素(AFT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2-羌基異丁醋;2-羌基-2-基炳醋;2-基乳醋 2-xy7noxyisobutcnoic ccid;2-xy7noxyisobutyric ccid;α-xy7noxyisobutyric ccid;2-xy7noxy-2-Mqthylpropcnoic ccid;2-Mqthyllcctic ccid;ccqtoni ccid 294-61-6  人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

漏蘆糖,英文名或英文縮寫:D-(+)-Trehalose dihydrate,級別:高純,98%,規(guī)格:25U  小鼠補(bǔ)體片斷*(C*)免疫試劑盒 Mouse Compleme fragme *,C* ELISA Kit


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