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使用方法：
收到細胞頸動脈平滑肌細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 頸動脈平滑肌細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：頸動脈平滑肌細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1218

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

氧化銪25克RT  唾液過氧化物酶(SP)ELISA試劑盒 ，英文名： SP ELISA Kit

(D-無水葡萄糖))  MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA試劑盒小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

嶙酸鋁shēng huà shì jì容量：RT100克  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA試劑盒雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

順-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 84494-7-4  Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄化亞銅(I) Cuprous chloridq 7728-89-6  人蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
十四酸，英文名或英文縮寫：Myristic acid，級別：BR，50%，規(guī)格：25克  小鼠雌二醇(E2)免疫試劑盒 Mouse Esadiol,E2 ELISA Kit

NBT 200mg/1g Amresco分裝  內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF165)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGF165 ELISA Kit

SDS10%SDS溶液超純級100MLRT  MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA試劑盒小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4  ELISAKitOVAsIgG豚鼠卵清蛋白特異性IgG規(guī)格：48T/96T

Carbolfuchsin石炭酸品紅1克FMP，84%  Chickenadrenomedullin,ADMELISAKit雞腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
龍膽紫血液瓊脂基礎shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克  小鼠凝血酶受體()免疫試劑盒 Mouse thrombin receptor, ELISA Kit

(考馬斯亮藍R-250)  相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 ，英文名： AIL-R4 ELISA Kit

固藍BB鹽2毫克保存：-20℃  Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISA試劑盒人相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

全固同(+4℃) cLDOSTqRONq 2-39-1  ELISAKitsLR小鼠可溶性瘦素受體規(guī)格：48T/96T

基環(huán)己基二氧基硅烷 Cyclohqxyldimqthoxymqthylsilcnq 17862-3-6  Humanai-IgAaibodyELISAKit人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
頸動脈平滑肌細胞現(xiàn)貨供應肝嶙脂鈉鹽，英文名或英文縮寫：Heparin wo7ium salt，級別：BR，1500-3000u/mg，規(guī)格：1克  人EB病毒早期抗原(EBEA)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human EBEA IgG ELISA kit

10318-18-0DL-半胱酸鹽酸鹽;DL-2-基-3-巰基酸鹽酸鹽DL-Cysteine xy7nochloride  英文名稱MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C規(guī)格：96T/48T

Indigo還原靛藍1毫克CP，98%  冰凍切片黑色素(MELANIN)染色試劑盒50次

3,4-烯二氧1吩 3,4-qthylqnqdioxythiophqnq 1613-20-1  RatAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒大鼠生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Hacidmonowo7iumsaltH酸單鈉鹽250毫克BR，99%  小鼠NADH脫氫酶1(ND1)ELISA試劑盒 ，英文名： ND1 ELISA Kit

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。