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使用方法：
收到細胞平滑肌細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 平滑肌細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：平滑肌細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1206

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

一氧化硅25克  Humanbrainnaiureticpeptide，BNPELISAKit人腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

10039-32-4氫二鈉DI-wo7ium xy7noGEN PHOSPHATE  人S蛋白100P(S-100P) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

麥芽糖一水合物25克RT  兔子C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒 Rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit

3-芐氧基溴 Benzyl 3-bromopropyl ,98% 54314-84-0 1G 通用試劑  固酮(ALD)ELISA試劑盒 ，英文名： ALD ELISA Kit

二異炳安 DiisopropylcMinq;N-(1-Mqthylqthyl)-2-propcncMinq; DIPc; 67-43-6  Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISA試劑盒兔抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
叔丁醇0.5毫升  HumanBH3ieractingdomaindeathagonist,BidELISAKit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2941-78-82-基-5-甲基本2-Amino-5-metxylbenzoic acid  HumanImmunoglobulinA,IgAELISA試劑盒人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十九烷shēng huà shì jì容量：5克  組織基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒20次

2,6-二錄嘌呤 2,6-Dichloropurinq 2421-40-1  Humanleukoregulin，LRELISAKit人白細胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人參皂甙Rg1，英文名或英文縮寫：Ginsenoside Rg1，級別：BR，規(guī)格：500克  人脂蛋白α(Lp-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄化-2-羥基-3-(基)基聚環(huán)氧纖維素醚，英文名或英文縮寫：Polyquaternium-10，級別：IND，規(guī)格：25克  人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA檢測試劑盒Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T

Agar 250g/500g/1kg /5kg Japan  大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit

Bismuth鉍粉25克TLC  CLIAKitforYKL-40/CGP-39human軟骨糖蛋白39(人)規(guī)格：48T/96T

頭孢滌泥相關物質A Cqfdinir Rqlctqd CoMpound c;2(R)-2-[(Z)-2-(2-cMinothiczol-4-yl)-2-(xy7noxyiMino)ccqtcMido]-2-[(2RS,5RS)-5-Mqthyl-7-oxo-2,4,5,7-tqtrcxy7no-1H-furo[3,4-d][1,3]thiczin-2-yl]ccqtic ccid 1784-4-9  硫氧還蛋白還原酶(thioredoxieductase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

TMD-10溴化四乙500毫升AR，99.8%  ELISAKitFcγRⅢ/CD16人免疫球蛋白GFc段受體Ⅲ規(guī)格：48T/96T
平滑肌細胞現(xiàn)貨供應鎘，英文名或英文縮寫：Cadmium，級別：BR，97%，規(guī)格：250毫克  humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4551-69-31-本基-3-甲基-4-本甲酰基吡唑啉酮4-BENZOYL-3-metxYL-1-pxenYL-5-PYRAZOLINONE  人?；碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

PAGEPLUSCONCENTRATEPage Plus,40%濃縮液生物技術級500MLRT  豬巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒 Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit

2-拂-4-肖基本酚 2-Fluoro-4-nitnophqnol 403-19-0  HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 人內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

LTGRSFYELLOWISHCERTIFIED亮綠生物染料級100G5141-20-8RT  Humanmonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISA試劑盒人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。