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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱： 肺動脈平滑肌細胞特價
簡稱：肺動脈平滑肌細胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1200

使用方法：
收到細胞肺動脈平滑肌細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

銥海棉shēng huà shì jì容量：10克  HumanHomocysteicacid，HcyELISAKit人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6088-51-32，2-二羥基二硫代-6，6-聯(lián)6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE  人前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

PHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸鹽層析緩沖液蛋白組學級100MLCOLD  豬心型脂肪酸結合蛋白(FABP3/FABP11/MDGI)免疫試劑盒 Pig Fatty acid-binding protein, hea,FABP3 ELISA kit

2-金剛烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISAKit 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

TEBUFFERPH7.0TE緩沖液050MLRT  Humanlivedneymicrosomeaoaibody,LKMELISA試劑盒人抗肝腎微粒體抗體(LKM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
雙岐桿菌生化基礎培養(yǎng)基100克  ELISAKitBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格：48T/96T

1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2  小鼠S100鈣結合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ，英文名： S100A7 ELISA Kit

甲基磺酸shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T

D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用試劑  大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit

吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6  英文名稱Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質類固醇(17-OHCS)規(guī)格：96T/48T
錄化鈉多粘菌素B肉湯基礎100毫升  Humancardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 人心肌轉錄因子GATA4ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

71119-22-73-(N-嗎啉基)丙磺酸鈉鹽 (MOPS-Na)MOPS wo7ium salt  HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISA試劑盒人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘酸鋅shēng huà shì jì容量：1公斤  組織糖原化學水解比色法定量檢測試劑盒20次

2,2-二基環(huán)炳晴 2,2-DiMqthylcyclopropyl Cycnidq 12778-61-2  humanhexokinase3,HK3ELISAKit人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乳香膠shēng huà shì jì容量：RT25克  人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肺動脈平滑肌細胞特價枸櫞酸，英文名或英文縮寫：litxium citrate，級別：AR，規(guī)格：25克  Humanprothrombinfragme1+2,F1+2ELISA試劑盒人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA規(guī)格：96T/48T

BCIP 100mg/250mg/1g/10g原裝 Amresco 0885  ELISAKitOSM小鼠抑瘤素M規(guī)格：48T/96T

MOPS10XDEPCMOPS溶液生物技術級500MLRT  HumanCollageypeⅣ，ColⅣELISAKit人Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

安芐青每速 cMpicillin; 69-23-4  人熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

metxyljasmonate反-3-氧代-2-(順-2-戊烯基)-環(huán)戊乙酸500克BR，50-52℃  小鼠牙本質基質蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Mouse Dein Maix Protein 1,DMP1 ELISA Kit