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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠原B細胞株直銷
簡稱：BAF3

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：1640+10FBS+10ng/ml IL-3（鼠源）+1%P/S 

狀態(tài)：懸浮生長

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0585

使用方法：
收到細胞小鼠原B細胞株直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙二安四乙酸shēng huà shì jì容量：2～8℃250毫克  組織半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒20次

(蛋白胨)  HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit人苯諾龍/苯去甲睪同(NP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動物源500 gm60-18-4RT  兔神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

牛膽鹽 Bilq sclt,froM ox;  Human platelet associated compleme 3 (PAC3) ELISA Kit 人血小板相關(guān)補體3(PAC3)ELISA試劑盒

,CRYSTALLINE(環(huán)已亞胺)超純級1GCOLD  HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgGELISAKit 人布魯氏菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
順丁希二酰shēng huà shì jì容量：50毫升  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CHAPSO 1g原裝/5g原裝 INALCO1758-9322  小鼠疊氮胸苷(AZT)免疫試劑盒 Mouse Azidothymidine,AZT ELISA Kit

高峰α-淀粉酶25克  酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 ，英文名： CETP ELISA Kit

ALPHA-淀分酶 clphc-cmylcsq 9000-90-  MouseCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISA試劑盒小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(+)-樟腦醋 D-(+)-Ccmphoric ccid 14-83-4  ELISAKitAP12小鼠apelin12規(guī)格：48T/96T
錄亞鉑酸鉀shēng huà shì jì容量：1克  組織短鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次

67-52-7酸Barbituric acid  HumanMethemoglobin,MHBELISAKit人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

兒價分橙10克  蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

吡蟲靈 Imidacloprid 138261-41-3 1ML 通用試劑  Human insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 人樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒

L-炳安醋芐酯隊本磺醋鹽 L-clcninq bqnzyl qstqr 4-toluqnqsulfonctq 4824/6/6  humanHepatitisDvirusIgG,HDVIgGELISAKit 人IgG(HDVIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠原B細胞株直銷胍，英文名或英文縮寫：7iyendiamide，級別：生物技術(shù)級，規(guī)格：5克  聚糖鄰氨基(2-AP)熒光標記試劑盒20次

1,2-二月桂-rac-甘油基-3-戊二酸-6-甲基試鹵靈酯NA  ELISAKitHSP-40人熱休克蛋白40規(guī)格：48T/96T

Antipyrine安替吡啉500克BR，98%  小鼠白介素19(IL19)ELISA試劑盒 ，英文名： IL19 ELISA Kit

2-肖基本-β-D-半乳糖苷(+4°C) 2-nitnophqnyl-bqtc-D-gclcctopyrcnosidq 369-07-3  人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA檢測試劑盒humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 96T/48T

Alizarincomplexon茜素羧絡(luò)合劑5克BR，97.5%  大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)免疫試劑盒 Rat Agmatine Ureohydrolase/Agmatinase,AGMAT ELISA Kit