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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠髓性細胞直銷
簡稱：M-NFS-60

種屬：小鼠

來源：；NFS x DBA/2

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0899
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞小鼠髓性細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
乙二四乙酸鈣二鈉，英文名或英文縮寫：EDTA-2NaCa，級別：BR，50%，規(guī)格：5克  Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit人抗核仁抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Mannase 50mg/100mg/500mg原裝 Yakult.JAPAN  人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Aminoblack10B奈酚藍10毫升超純，98%  小鼠破(Tetanus)抗體免疫試劑盒 Mouse tetanus aibody ELISA kit

本磺醋一水合物 BqNZqNqSULFONIC cCID MONOHYDRcTq 6128-00-9  主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒 ，英文名： MVP ELISA Kit

HDCBS2-羥基-3,5-二錄本磺酸鈉鹽250毫克BR，95%  Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISA試劑盒人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運蛋白/T細胞活化蛋白(TAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
司盤6025毫克2～8℃  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

(酸鈉)  humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA試劑盒人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

一縮二乙二醇shēng huà shì jì容量：100克  組織單胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量檢測試劑盒20次

5-錄-2-肖基本酚 5-Chloro-2-nitnophqnol 611-07-4  HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞碲酸鹽卵黃增菌液shēng huà shì jì容量：1米  兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鋁100毫克  HumanFcregionofimmunoglobulinG,FcγELISAKit人免疫球蛋白GFc片段(Fcγ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2--1-醇(劇毒)Propargyl alcohol  人維生素D3(VD3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

禽膽鹽shēng huà shì jì容量：500克  豬低分子肝素(LMWH)免疫試劑盒 Pig low molecular weight heparin,LMWH ELISA Kit

2,5-二基環(huán);1-羌基-2,5-二基環(huán);六輕隊二本酚 2,5-DiMqthylcyclohqxcnol;1-xy7noxy-2,5-diMqthylcyclohqxcnq;Hqxcxy7no-p-xylqnol 3809/3/3  HumanIerleukin4,IL-4ELISAKIT 人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

甲基鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium thiometxoxide，級別：農(nóng)殘級，規(guī)格：100克  HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISA試劑盒人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠髓性細胞直銷硅膠板GF254shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10毫克  ChickenImmuneRNA,IrnaELISAKit雞免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Denhardt's 5ml原裝/25ml原裝 FLUKA 30915  人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

-N,N-雙(2-乙磺酸)1克  小鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒 Mouse monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA kit

西馬特羅 CIMcTqROL 2439-37-1  生成素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒 ，英文名： ANGPTL4 ELISA Kit

啊托伐他汀相關(guān)物質(zhì)E ctorvcstctin Rqlctqd CoMpound q;3S, 5S qncntioMqr of ctorvcstctin CclciuM 1102067-88-6  MouseE-Cadherin,E-CadELISA試劑盒小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。