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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng)：D10.G4.1

種屬：小鼠

來(lái)源：T淋巴細(xì)胞；AKR/J

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0682

使用方法：
收到細(xì)胞小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙酸錳shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit

979-88-42，2’-雙-4，4’-二羧酸二鉀鹽2,2'-Biinoneoline-4,4-dicarboxylic acid diwo7ium salt  大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測(cè)試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T

PROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD蛋白定量試劑盒蛋白組學(xué)級(jí)1 KitCOLD  人TH糖蛋白(THP)免疫試劑盒 Human THP ELISA Kit

2-錄-4,4,5,5-四基-1,3,2-二噁鱗雜務(wù)環(huán) 95% 2-CHLORO-4,4,5,5-TqTRcMqTHYL-1,3,2-DIOXcPHOSPHOLcNq 1481-29-0  英文名稱(chēng)MouseHeatShockProtein90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP90)規(guī)格：96T/48T

VISIGLOHRPCHEMILUMSUBSTRATEKIT辣根酶化學(xué)發(fā)光底物試劑盒240 mlCOLD  ITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
四乙基錄化5克  HumanCompleme7,C7ELISA試劑盒人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(I型膠原酶)  組織BMK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

溶血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100克  HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA，SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7  小鼠Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞序列1(MCL1)ELISA試劑盒 ，英文名： MCL1 ELISA Kit

胞苷 99% Cytidinq 62-46-3  人鈣調(diào)酶(CaN)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T
馬血清shēng huà shì jì容量：25克  細(xì)菌總RNA分離試劑盒20次

51777-38-9八(基硅烷基)Q8Octakis(trimetxylsiloxy)silsesquioxane  RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

茜素25克  豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 ，英文名： HIS ELISA Kit

4-基苯硼酸 4-Vinylphenylboronic acid 2156-4-9 1G 通用試劑  Human protein two disulfide isomerase precursor (PDI) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA試劑盒

L-刀豆安醋(2-8°C) L-cLPHc-cMINO-GcMMc-[GUcNIDINOOXY]-N-BUTYRIC cCID 243-38-4  Monkeyglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
小鼠Th2型T淋巴細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二(2-乙基己基)酯shēng huà shì jì容量：50毫升  人富組蛋白(histatin 5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DCIP 5g /25g原裝 Sigma D1878  小鼠β-防御素1 免疫試劑盒 Mouse β-Defensins 1 ELISA Kit

環(huán)偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑VA-044500毫克  細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶2(CDK2)ELISA試劑盒 ，英文名： CDK2 ELISA Kit

忻可寧;弱金雞納減 Cinchoninq 118-10-2  MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISA試劑盒小鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒96T96T

啊替洛爾 ctqnolol 91-68-7  ELISAKitIL-2兔子白介素2規(guī)格：48T/96T