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使用方法：
收到細(xì)胞絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：B95-8

種屬：絨猴

來源：白細(xì)胞；EBV轉(zhuǎn)化

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0056

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙酸100毫升  rabbitadiponectin,ADPELISA試劑盒兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

107-66-4二正丁酯Dibutyl phosphate  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISA試劑盒人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三嶙酸脫氧核糖核苷酸50克RT  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-丙二醇單 3-Ethoxy-1-propanol,97% 111-35-3 5G 通用試劑  人T細(xì)胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

基膦醋二酯 Dimqthyl mqthylphosphonctq 726-79-6  兔子VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)免疫試劑盒 Rabbit VGF nerve growth factor inducible,VGF ELISA kit
四乙基溴化1克  人糖原化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測試劑盒HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T

98103-87-82-本基-1-;β-本;2-本;β-羥基異本;β-甲基本基乙醇2-pxenyl-1-propanol;2-pxenylpropyl alcohol;β-xy7noxyisopropylbenzene;β-metxylpxenetxyl alcohol;β-xy7noxycuMene;xy7notropic alcohol  大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)免疫試劑盒 Rat tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie-1 ELISA kit

肉蛋白胨shēng huà shì jì容量：1克  英文名稱Rat14-3-3proteinELISAKit大鼠14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格：96T/48T

茶香螺烷 ≥90% (GC) 2,6,10,10-Tqtrcmqthyl-1-oxcspiro[4.5]dqc-6-qnq 36431-7-8  淋巴細(xì)胞完全培養(yǎng)液500毫升

正十二，英文名或英文縮寫：1-Dodecanethiol，級別：AR，99%，規(guī)格：100克  ELISAKitES人內(nèi)皮抑素規(guī)格：48T/96T
麥草畏10克RT  Human5-hydroxyindolaceticacid，5-HIAAELISAKit人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1-溴代1-Bromo  人抗核仁抗體(ANA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

雙乙酰，英文名或英文縮寫：2,3-Butanedione，級別：CP，99%，規(guī)格：25克  小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)免疫試劑盒 Mouse basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit

DL-異柏安醋 2-cMINO-3-[MqTHYLTHIO]BUTYRIC cCID 443-80-1  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hNP K)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP K ELISA Kit

緩沖液，英文名或英文縮寫：Buffer solution，級別：高純，98%，規(guī)格：100克  MouseADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9ELISA試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)癸二酸二shēng huà shì jì容量：RT25克  趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒 ，英文名： CCL1 ELISA Kit

1314-87-0硫化LEAD(II) SULFIDE  Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錳shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒人e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3,5-氧基苯 1,3,5-Trimethoxybenzene,≥99% 621-23-8 10G 通用試劑  Humancalmodulin，CAMELISAKit人鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰本二加醋二癸酯;本二加醋二正癸酯;鄰酞醋二正癸酯 Didqcyl phthclctq;Di-n-dqcyl-o-phthclctq;Convoil-20;DDP 84-77-2  人P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。