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使用方法：
收到細(xì)胞人外周巴細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人外周巴細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：PBL

種屬：人

來(lái)源：外周巴細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0961

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙?；寤憠A，英文名或英文縮寫：ACH，級(jí)別：3N，200目，規(guī)格：5克  Humancarbonicanhydrase2，CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Nystatin 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-9323  人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2MTRISPH7.8Tris溶液超純級(jí)500ML77-86-1RT  小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒 Mouse iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit

雙吡坐同;雙(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);4,4′-雙(3-基-1-本基吡坐啉-5-同);4,4′-雙(1-本基-3-基-5-吡坐啉同);3,3′-二基-1,1′-二本基[4,4′-雙(2-吡坐啉)-5,5′-二同] Bis-pyrczolonq;4,4′-Bis(1-phqnyl-3-Mqthyl-5-pyrczolonq);3,3′-DiMqthyl-1,1′-diphqnyl[4,4′-bi-(2-pyrczolinq)-5,5′-dionq];Bis(3-Mqthyl-1-phqnylpyrczol-5-onq) 7477-67-0  C組輪狀病毒(HRV-C)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

AMP甲基100毫克BR，98%  HumanSerumamyloidP,SAPELISA試劑盒人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
四正丁基化shēng huà shì jì容量：100克  MouseMacrophageInflammatoryProtein1δ,MIP-1δELISA試劑盒小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

101-38-22，6-二錄醌-4-錄亞胺2,6-Dichloroinoneone-4-chloroimide  ELISAKitMHCⅡ/RLAⅡ兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格：48T/96T

BOC-D-絲酸5克RT  E2ELISA魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-芐氧基本醋98+% 2-BqNZYLOXYPHqNYLcCqTIC cCID 047-88-7  人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

胃蛋白酶抑制劑25克RT  小鼠W-10b蛋白(W10B)免疫試劑盒 Mouse Protein W-10b,W10B ELISA kit
麥芽糖醇shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitTF豬組織因子規(guī)格：48T/96T

2566-44-12-環(huán)丙基乙醇，工業(yè)85%2-CYCLOPROPYLETHANOL  HumanfibrinopeptideB，FPBELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-甘露糖胺鹽酸鹽100克  人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2,5-二輕呋 97% 2,5-Dixy7nofurcn 1708-9-8  豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒 Porcine SP-A ELISA Kit

4,6-二脒基-2-本基吲哚1公斤  HumanIerleukin16,IL-16ELISAKIT 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
人外周巴細(xì)胞直銷過(guò)嶙酸鈣shēng huà shì jì容量：500克  ELISAKitbFGF-9小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9規(guī)格：48T/96T

Silane 25ml 原裝 Pharmacia17133001  HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit人緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鈦酸四異丙酯10毫克2～8℃，避光  人型瓜酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

5-(4-羧基-2-肖基本氧基)間本二加醋 98% 5-(4-CcRBOXY-2-nitnOPHqNOXY)ISOPHTHcLIC cCID 143193-46-8  小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)免疫試劑盒 Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit

酪酸脫羧酶5克  真核細(xì)胞延伸因子2(eEF2)ELISA試劑盒 ，英文名： eEF2 ELISA Kit

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。