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使用方法：
收到細胞人套細胞細胞現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人套細胞細胞現(xiàn)貨供應
簡稱：Granta-519

種屬：人

來源：套細胞；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0461

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA試劑盒人抑素/穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三結合盒轉運體G2(ABCG2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質體2000，英文名或英文縮寫：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

蠶蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用試劑  兔子肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

二流代赤蘚醇 Dithioqrythritol　(DTq) 689-68-8  三角形四肽重復蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
蘇木色精25克  小鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒 Mouse ai-IgE receptor aibody ELISA Kit

14337-53-2環(huán)氧樹脂2-(5-BROMO-2-PYRIDYLAZO)-5-(DIetxylAMINO)pxenOL  游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 ，英文名： f-Hb ELISA Kit

草酸低鐵，英文名或英文縮寫：Ferrous oxalate dihydrate，級別：3N，規(guī)格：25克  Lensculinarisagglinin,LCAELISA試劑盒扁豆凝集素(LCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰錄本安 2-Chlorocnilinq 92-21-  ELISAKitBMPs小鼠骨形成蛋白規(guī)格：48T/96T

，英文名或英文縮寫：MSA，級別：BR，99%，規(guī)格：10克  Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
毛地黃皂苷5克RT  組織S6KINASE激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

9001-42-7α-葡糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.20  Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

五氧化二鈳，英文名或英文縮寫：Niobium(V) oxide，級別：BR，45%，規(guī)格：500毫克  兔子補體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-磺基苯酐 2-Sulfobenzoic anhydride,98% 1981-8-3 25G 通用試劑  Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 人內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒

LiChroCcRT@250-4  Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
人套細胞細胞現(xiàn)貨供應海藻糖無水物shēng huà shì jì容量：RT5克  Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒人核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

10387-40-3硫代乙酸鉀potewwium thioacetate  HumanCaldesmon，CALDELISAKit人鈣調結合蛋白(CALD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

免疫血清兔抗人IgG，Fcshēng huà shì jì容量：RT250克  人P53抗體(P53-ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3-基對 2-Methoxy-5-methylaniline,99% 120-71-8 25G 通用試劑  兔子Ⅰ型膠原N末端肽(X)免疫試劑盒 Rabbit cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,X ELISA Kit

醋醋雙拂拉松 Diflorcsonq Diccqtctq 33264-31-7  趨化因子CXCL16(CXCL16)ELISA試劑盒 ，英文名： CXCL16 ELISA Kit

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。