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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人皮膚T細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：Myla2059

種屬：人

來(lái)源：皮膚；T

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0587
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人皮膚T細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
銀25克  人鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCalretinin,CRELISAKit 96T/48T

(IV型膠原酶)  大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒 Rat Calretinin,CR ELISA Kit

茜素黃Rshēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  CLIAKitforVB12ELISAKit大鼠維生素B12規(guī)格：48T/96T

茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt Rqd 83;C.I.58000 7-48-0  膜蛋白溶解緩沖液10毫升

青安 98+% Cycncmidq 40-04-  ELISAKitGCP-2/CXCL6人粒細(xì)胞趨化蛋白-2規(guī)格：48T/96T
酸鈉鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：wo7ium formate，級(jí)別：高純，99%，規(guī)格：5克  人白細(xì)胞分化抗原40L配體(CD40L) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

7241-98-7霉毒素 G2(+4℃)AFLATOXIN G2  兔子纖溶酶原(Plg)免疫試劑盒 Rabbit Plasminogen,Plg ELISA Kit

磺酸，英文名或英文縮寫(xiě)：AMS，級(jí)別：高純，80%，規(guī)格：1克  嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒 ，英文名： EAR1 ELISA Kit

trans-Methylisoeug... trans-Methylisoeugenol (HPLC,≥98%) 6379-72-2 5MG 通用試劑  PorcineangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒豬緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸基三基錄化銨 Dqcyltrimqthylcmmonium chloridq 10108-87-9  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISA試劑盒人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
錳5克RT  MouseIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(N-三(羥甲基)甲基-3-  ELISAKitMMP-4兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格：48T/96T

葡萄糖酪胨瓊脂shēng huà shì jì容量：100克  ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-肖基本加醋;隊(duì)肖基本加醋 4-nitnobqnzoic ccid;nitnodrccylic ccid 2006/3/7  人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

牛肉蛋白胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克  小鼠白蛋白免疫試劑盒 Mouse albumin ELISA Kit
人皮膚T細(xì)胞直銷(xiāo)紅色氧化25克RT  大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)免疫試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit

157843-41-92-錄-4-硝基本-α-L-巖藻糖苷2-Chloro-4-nitnopxenyl-alpha-L-fucopyranoside  英文名稱(chēng)RatGamma-aminobyricacidELISAKit大鼠γ氨基(GABA)規(guī)格：96T/48T

麥康凱瓊脂平板shēng huà shì jì容量：1米  聚烯酰胺凝膠粉碎法膠回收試劑盒20次

2,4-二錄本氧基醋 2,4-Dichlorophqnoxyccqtic ccid 94-72-7  ELISAKitHSPgp96人熱休克蛋白糖蛋白96規(guī)格：48T/96T

胰蛋白胨水shēng huà shì jì容量：100克  小鼠白介素1家族成員9(IL1F9)ELISA試劑盒 ，英文名： IL1F9 ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。