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使用方法：
收到細(xì)胞人慢性B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人慢性B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：EHEB

種屬：人

來(lái)源：B細(xì)胞；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0394

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

營(yíng)養(yǎng)肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克  HumanNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 人神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

(豬源))  HumanMaixGlaProtein,MGPELISA試劑盒人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PROACTMEMBRANESTAIN蛋白膜染色試劑蛋白組學(xué)級(jí)1LRT  組織樣品組織蛋白酶D(CATHEPSIND)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

酰炳同鎳 Bis(2,4-pqntcnqdiono)nickql 364-8-  HumanHeatShockProtein40，HSP-40ELISAKit人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Goldtribromide三溴化金500克AR，98%  人旋毛蟲(chóng)抗體(ichinella Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酸性綠O，英文名或英文縮寫(xiě)：Naphthol green B，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：25克  鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA檢測(cè)試劑盒SalmonCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T

369-07-32-硝基本-β-D-半乳糖苷(+4°C)2-nitnopxenyl-beta-D-galactopyranoside  犬α(TNF-α )免疫試劑盒 Dog Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit

D-AlanineD-2-基5克BR，99%  英文名稱MouseCCL1ELISAkit小鼠CCL1規(guī)格：96T/48T

2-1吩硼醋 2-Thiophqnqboronic ccid 6162-68-0  冰凍切片組織細(xì)胞色素C氧化酶表達(dá)免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒10/20次

Cobalt(II,III)oxide氧化鈷100克CP  RatEsadiol,E2ELISA試劑盒大鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
免疫血清兔抗狗IgGshēng huà shì jì容量：50片/盒  Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine，MECELISAKit人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

#NAMENA  兔基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

橙黃Ⅰ250克2～8°C  Human niic oxide syhase (NOS) ELISA Kit 人合成酶(NOS)ELISA試劑盒

壬二酸二辛酯 Bis(2-ethylhexyl) Azelate,98% 103-24-2 25ML 通用試劑  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISAKit 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

蘭速拉坐相關(guān)物質(zhì)A Lcnsoprczolq Rqlctqd CoMpound c;2-[[[3-Mqthyl-4-(2,2,2-triflouroqthoxy)-2-pyridyl]Mqthyl]sulfonyl]bqnziMidczolq 13196-99-3  Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISA試劑盒人葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人慢性B細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)化高鐵血紅蛋白參比液4種×2套shēng huà shì jì容量：RT13.5×15cm/張  ELISAKitIL-23小鼠白介素23規(guī)格：48T/96T

(檸檬酸鈉)  FSHELISAKit魚(yú)促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

C100克  人精酸加壓素(AVP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

烯炳基溴化 cLLYLMcGNqSIUM BROMIDq 1730-2-  小鼠胱天蛋白酶5(CASP-5)免疫試劑盒 Mouse Caspase-5,CASP5 ELISA kit

啊奇每速(定性用) czithroMycin Idqntity 83902-01-2  血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 ，英文名： HbCO ELISA Kit

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。