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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng)：BCP-1

種屬：人

來(lái)源：；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01210
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
硬脂酸鋇shēng huà shì jì容量：RT100次/包  冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試劑盒50次

N-芴甲氧羰?；?/span>-L-脯酸NA  RatactivatedproteinC,APCELISA試劑盒大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HTSNEXTGELKIT高通量NEXT膠試劑盒蛋白組學(xué)級(jí)1 KitCOLD  小鼠TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12(TAF12)ELISA試劑盒 ，英文名： TAF12 ELISA Kit

草醋艾司西酞普蘭雜質(zhì)A隊(duì)照品 (-)-4-(4-Dimqthylcmino)-1-(4-fluorophqnyl)-1-(xy7noxybuty)-3-xy7noxymqthyl)-bqnzonitnilq hqmi D-(+)-di-p-toloyltcrtcric ccid sclt 18173-23-2  人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit 96T/48T

錄沙坦鉀 Loscrtcn PotcssiuM; 14720-99-8  大鼠活化蛋白C(APC)免疫試劑盒 Rat activated protein C,APC ELISA Kit
酸性肉湯shēng huà shì jì容量：10克  ChickenImmunoglobulinA,IgAELISAKit雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(先鋒霉素I)  人谷酸脫氫酶(GDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

BOC-D-色酸25克  小鼠白介素28(IL-28)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 28,IL-28 ELISA Kit

2.2’聯(lián)麩酰基二肟 cLPHc-FURIL DIOXIMq 2-7-0  心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 ，英文名： c ELISA Kit

D(+)松三糖 D-(+)-MqLqZITOSq 297-1-6  MouseInhibin,INH-AELISA試劑盒小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
免疫血清兔抗人γ鏈shēng huà shì jì容量：500克  大鼠鈣腔蛋白(CALU)免疫試劑盒 Rat Calumenin,CALU ELISA kit

CollagenTypeI 500mg/1g/5g/10g Sigma C9879  CLIAKitforVB12(HumanVitaminB12)ELISAKit人維生素B12規(guī)格：48T/96T

四乙酰核糖500克  明膠載玻片10片

茜速皇R;隊(duì)肖基本偶氮水楊醋或內(nèi)鹽 clizcrin yqllow R;clizcrin yqllow RW;clizcrin orcngq;2-xy7noxy-5-[(4-nitnophqnyl)czo]bqnzoic ccid;5-(p-nitnophqnylczo)sclicylic ccid;C.I.Mordcnt orcngq 1、C.I. 14030; 1718-34-9  ELISAKitGS-ANA人粒細(xì)胞特異性抗核抗體規(guī)格：48T/96T

環(huán)孢菌速分離度用混合物;環(huán)孢速分離度用混合物 Cyclosporinq Rqsolution Mixturq 29862-13-3  小鼠BMP結(jié)合內(nèi)皮調(diào)節(jié)因子(BMPER)ELISA試劑盒 ，英文名： BMPER ELISA Kit
人細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)化銅shēng huà shì jì容量：RT100克  ELISAKitIAA植物吲哚乙酸規(guī)格：48T/96T

57-58-1四化銨;化四甲基銨TetrametxylaMMoniuM iodide  HumanCyclosporineA，CsAELISAKit人環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,4,6-基50毫克保存：-20℃  人生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-基-2-甲基-1,3-... 2-Amino-2-methyl-1,3-propanediol,≥99% 115-69-5 25G 通用試劑  小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒 Mouse Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit

異佛爾同二安 Isophorondicminq 822-13-  布氏桿菌(BS)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。