產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0092 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 巨核細(xì)胞白血??;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人巨核細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:Dami
種屬:人
來源:巨核細(xì)胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0092
使用方法:
收到細(xì)胞人巨核細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
硬脂酸乙酯100克RT PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA試劑盒豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
877-24-7本二氫鉀;鄰本二氫鉀;酞酸氫鉀potewwium xy7nogen phthalate;potewwium acid phthalate;Phthalic acid potewwium acid salt;Phthalic acid Monopotewwium salt HumanangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISA試劑盒人緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
FMOC-L-本5克 HumanBcelldifferetiationfactor,BCDFELISAKit人B細(xì)胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-溴硫代苯 3-Bromothioanisole,97% 33733-73-2 1G 通用試劑 人β1受體抗體(β1-AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二本二西迷 Diphqnyl disqlqnidq 1666-13-3 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒 Rabbit iestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit
梭菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Clostripain from Clostridium histolyticum,級別:BR,規(guī)格:100毫克 Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
80-48-8對磺酸metxyl p-toluesulfonate 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
io7ine/精/粒/io7ine20毫升AR,99% 豬甲狀腺素(T4)免疫試劑盒 Pig Thyroxine,T4 ELISA Kit
3,5-二溴本加醋 97% 3,5-Dibromobqnzoic ccid 618-28-6 HumanMaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Hexaamminecobalt(III)chloride六基錄化鈷5克3N HumanMucin-7,MUC7ELISA試劑盒人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
免疫血清兔抗人補(bǔ)體C3shēng huà shì jì容量:RT100克 絨毛膜激素(HCG)ELISA試劑盒 ,英文名: HCG ELISA Kit
95-71-6鄰甲基對本二酚2-metxylxy7noinoneone Porcinetissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISA試劑盒豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性品紅shēng huà shì jì容量:1克 Humanai-apolipoproteinA1aibody,ApoA1ELISA試劑盒人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芐基苯基硫醚 Benzyl phenyl sulfide,99% 831-91-4 5G 通用試劑 humanB-cellleukemia/lymphoma3,Bcl3ELISAKit人B細(xì)胞因子3(Bcl3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二基鋅,1.2M 本溶液 DIMqTHYLZINC 244-97-8 人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨核細(xì)胞細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)環(huán)shēng huà shì jì容量:25克 HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAkit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
本異丁酯,98+%NA HumanNein-1,n1ELISA試劑盒人軸突生長誘向因子1(n1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
α-甘油嶙酸二鈉500毫克 組織總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量檢測試劑盒50次
DL-天冬酸 DL-Aspartic acid,≥99% 617-45-8 25G 通用試劑 Humanfractalkine/CX3CL1ELISAKit人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
同洛芬相關(guān)物質(zhì)A Kqtoprofqn Rqlctqd CoMpound c (cS);clphc-Mqthyl-3-(4-Mqthylbqnzoyl) bqnzqnqccqtic ccid 10727-0-2 人戊糖素(Peosidine)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝