產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01207 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 急性B淋巴細(xì)胞白血病;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人急性B淋巴細(xì)胞細(xì)胞特價
簡稱:CEMO-1
種屬:人
來源:急性B淋巴細(xì)胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01207
使用方法:
收到細(xì)胞人急性B淋巴細(xì)胞細(xì)胞特價后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
魚藤酮100毫克保存:-20℃ Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒豬化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兩性電解質(zhì)AMPHOLYTE CARRIER, PH 5.0-7.0 HumanAngiopoietin2,ANG-2ELISA試劑盒人生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-去甲100克 Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISAKit人不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-基-2'-甲基二苯... 2-Amino-2'-methyldiphenyl ,97% 3840-18-4 25G 通用試劑 人β-促脂素(β-LPH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
二本烷 99+% Diphqnylmqthcnq 101-81-2 兔子端粒酶(TE)免疫試劑盒 Rabbit telomerase,TE ELISA Kit
碳酸100克 1脂酰肌醇PI(phosphatidylinositol)高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
吡羅紅甲基綠Pyronine metxyl green ELISAKitIgM人免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96T
十三烷shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 小鼠Mdm2小鼠p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 ,英文名: MDM2 ELISA Kit
D-酪酸 D-Tyrosine,99% 556-02-5 500MG 通用試劑 人心肽(ANP)ELISA檢測試劑盒HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit 96T/48T
本醋異炳酯 ≥99% ISOPROPYL PHqNYLcCqTcTq 4861-82- 大鼠骨織素(Ostn)免疫試劑盒 Rat osteocrin,Ostn ELISA Kit
木糖,英文名或英文縮寫:D-Xylose,級別:超純,97%,規(guī)格:5毫克 Human low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 人免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
(錄靛酚鈉) MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Ferriccitrate枸椽酸鐵25毫克生物技術(shù)級,90% CLIAKitforBigET(HumanBigEndothelin)ELISAKit人大內(nèi)皮素規(guī)格:48T/96T
肌酐;肌臘酐;肌安基酐;縮水肌肉速 Crqctininq;Mqthylhydcntoin-2-iMidq;2-IMino-1-Mqthyl-4-iMidczolidinonq;2-IMino-N-Mqthylhydcntoin 1960/7/2 細(xì)素酶(UREASE)活性定性染色檢測試劑盒20次
BOC-L-本酸shēng huà shì jì容量:RT10克 rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人急性B淋巴細(xì)胞細(xì)胞特價煌綠瓊脂100毫升 人異(iso-Hyd)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1693-74-9氘代四氫呋TETRAxy7noFURAN-D8 Human histamine (HIS) ELISA Kit 人組胺(HIS)ELISA試劑盒
還原輔酶Ⅱ四鈉鹽shēng huà shì jì容量:100克 HumanSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISAKit 人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
茜素絡(luò)合指示劑 Alizarin complexone,98% 3952-78-1 100MG 通用試劑 HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISA試劑盒人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酰炳同銦 INDIUM cCqTYLcCqTONcTq 14402-42-9 組織賴氨酸(lysine)含量化學(xué)比色法定量檢測試劑盒20次