產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0338 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱:AsPC-1
種屬:
來源:
培養(yǎng)基: 1640+10%FBS+1%P/S
狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0338
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞直銷后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine 中文名:N4-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C16H17N3O5 雙氫睪(DHT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine 中文名: 分子式:C7H9N3O2 豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide 中文名:N-[雙(甲硫基)亞甲基]對(duì)甲苯磺酰胺 分子式:C10H13NO2S3 豬B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine 中文名: 分子式:C21H14ClFIN3O 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine 中文名: 分子式:C14H23N3O3S 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬球蛋白Gelisa試劑盒 豬球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬球蛋白G試劑盒、豬球蛋白Geisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Stavudine 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4 度:98.0%
豬球蛋白G(IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Stellasterol 中文名:星魚甾醇 分子式:C28H46O 度:96.0%
豬球蛋白Eelisa試劑盒 豬球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬球蛋白E試劑盒、豬球蛋白Eeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Stavudine 中文名:司他夫定 分子式:C10H12N2O4
豬球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Stigmast-4-ene-3β,6β-diol 113626-76-9 中文名:豆甾-4-烯-3β,6β-二醇 分子式:C29H50O2 度:93.0% 關(guān)鍵詞: 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
豬球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T Stellasterol 中文名:星魚甾醇 分子式:C28H46O
5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C18H27N3O4 度:98.0% 脫氧核糖核酸酶I 100mg
1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C14H17N3O4 度:98.0% DNaseI,frombovinepancreas
Bendamustine 中文名:鹽酸苯達(dá)莫司汀 分子式:C16H22Cl3N3O2 度:98.0% 三0酸脫氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml
1,6-Dibromopyrene 中文名:1,6-二溴芘 分子式:C16H8Br2 度:98.0% dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP) 100x0.5ml
Tapentadol 中文名: 分子式:C14H24ClNO 度:98.0% 脫氧膽酸 10g
人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞直銷兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 1207441-49-3 中文名: 分子式:C29H46O3 度:97.5% 關(guān)鍵詞:
兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol 931114-98-6 中文名: 分子式:C10H10O2 度:% 關(guān)鍵詞: 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 中文名: 分子式:C29H46O3
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮 分子式:C10H11NO2 度:98.0%
兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αelisa試劑盒 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 7α-Hydroxystigmasterol 64998-19-2 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 度:% 關(guān)鍵詞: 狼毒; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。