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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱：PtK1(NBL-3)

種屬：長鼻袋鼠

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0038
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Methylprednisolone acetate  53-36-1  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠雙鏈DNA   英文名稱：   Double sand DNA   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   dsDNA

Methylprednisolone  83-43-2  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠多巴胺   英文名稱：   Dopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Dopamine

Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠D乳酸   英文名稱：   Mouse D Lactic Acid   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DLA

Methyl levulinate  624-45-3  中文名：  分子式：  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠凝血酶受體elisa試劑盒   小鼠凝血酶受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠凝血酶受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠凝血酶受體試劑盒、小鼠凝血酶受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Fosaprepitant dimeglumine  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P  度：98.0%

小鼠凝血酶受體()ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Fudosteine  13189-98-5  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠凝血酶受體()ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Formestane  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3  度：98.0%

小鼠凝血酶敏感蛋白-1   英文名稱：   thrombospondin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TSP-1  Folic acid  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6  度：98.0%

小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物elisa試劑盒   小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒、小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Fosaprepitant dimeglumine  中文名：  分子式：C30H40F7N6O10P
Prasugrel  150322-43-3  中文名：普拉格雷  分子式：C20H20FNO3S    豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

Fexofenadine   153439-40-8  中文名：鹽酸非索非那定  分子式：C32H40ClNO4    Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人抗原(PHC)ELISA試劑盒

Adefovir  106941-25-7  中文名：阿德福韋  分子式：C8H12N5O4P    rabbitiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit 兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

trans-4-Aminocyclohexanol  27489-62-9  中文名：  分子式：C6H13NO    CLIAKitforATG(Humanai-thymocyteglobulin)ELISAKit人抗胸腺細(xì)胞球蛋白規(guī)格：48T/96T

Cyproheptadine   969-33-5  中文名：鹽酸賽庚啶  分子式：C21H22ClN    線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次
袋鼠腎細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  鱸魚皮質(zhì)醇   英文名稱：   Coisol   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CO

Olopatadine   中文名：鹽酸奧洛他定  分子式：C21H24ClNO3  度：98.0%  鱸魚溶菌酶/胞壁質(zhì)酶   英文名稱：   Lysozyme /Muramidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Lysozyme

Tenofovir  中文名：泰諾福韋  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Naftopidil di  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3  度：98.0%  細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測(cè)試劑盒   48T

Zileuton  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  偽毒(PRV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。