產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0669 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 牙周膜;成纖維細胞 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人牙周膜成纖維細胞現(xiàn)貨供應
簡稱:HPDLF
種屬:人
來源:牙周膜;成纖維細胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0669
使用方法:
收到細胞人牙周膜成纖維細胞現(xiàn)貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 947529-92-2 中文名: 分子式:C20H36O3 度:97.0% 關鍵詞: 小鼠前體蛋白(TpP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate 60263-06-1 中文名: 分子式:C10H12O4 度:% 關鍵詞: 千里光屬; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Ethopabate 1959/6/3 中文名:乙氧酰胺苯甲酯 分子式:C12H15NO4 度:99.0% 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Estrone 53-16-7 中文名:雌酮 分子式:C18H22O2 度:99.0% 關鍵詞: 小鼠骨保護素(OPG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate 63042-18-2 中文名:雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯 分子式:C29H34O4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠B因子(BF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體elisa試劑盒 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒、小鼠抗增殖細胞核抗原抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Estradiol hexahydrobenzoate 中文名:環(huán)己甲酸雌二醇 分子式:C25H34O3
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Estradiol valerate 979-32-8 中文名:戊酸雌二醇 分子式:C23H32O3 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠抗胰蛋白酶elisa試劑盒 小鼠抗胰蛋白酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗胰蛋白酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗胰蛋白酶試劑盒、小鼠抗胰蛋白酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Ketoprofen 中文名:酮基布洛芬 分子式:C16H14O3
小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Estradiol valerate 979-32-8 中文名:戊酸雌二醇 分子式:C23H32O3
小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estradiol 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2 度:99.0%
Atractylodin 55290-63-6 中文名:蒼術素 分子式:C13H10O Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Crenulatin 63026-02-8 中文名:大花紅天素 分子式:C11H20O6 HumanD-Dimer,D2DELISA試劑盒人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1-Monopalmitin 542-44-9 中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 組織IRAK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Ethyl β-D-apiofuranoside 1932405-61-2 中文名: 分子式:C7H14O5 Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Myricadenin A 1612239-23-2 中文名: 分子式:C39H40O17 兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人牙周膜成纖維細胞現(xiàn)貨供應Toltrazuril 69004-03-1 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S 兔球蛋白M(rabbit IgM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 兔球蛋白E(rabbit IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Temozolomide 85622-93-1 中文名:替莫唑胺 分子式:C6H6N6O2 兔白介素17(IL-17)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pyrimethamine 58-14-0 中文名:乙胺嘧啶 分子式:C12H13ClN4 兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Pentoxyverine 23142-01-0 中文名:枸櫞酸噴托維林 分子式:C26H39NO10 兔去甲上腺素(NA)ELISAKit ELISA. 96T/48T