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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人牙齦上皮細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：HGE

種屬：人

來源：牙齦；上皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01052
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人牙齦上皮細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate  中文名：雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯  分子式：C29H34O4    豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Estradiol valerate  中文名：戊酸雌二醇  分子式：C23H32O3    豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Estradiol hexahydrobenzoate  中文名：環(huán)己甲酸雌二醇  分子式：C25H34O3    豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Estradiol heptanoate  中文名：庚酸雌二醇  分子式：C25H36O3    豬球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Estradiol  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2    豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(PERV)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法)   48T
中文名稱   方法   規(guī)格  Toltrazuril  中文名：托曲珠利  分子式：C18H14F3N3O4S  度：98.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  Tolazoline   中文名：鹽酸妥拉唑林  分子式：C10H13ClN2  度：98.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  Tokinolide B  中文名：  分子式：C24H28O4  度：96.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  Tofacitinib   中文名：枸櫞酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8  度：98.0%

中文名稱   方法   規(guī)格  Tiotropium bromide  中文名：噻托溴銨  分子式：C19H22NO4S2  度：98.0%
Myricadenin A  中文名：  分子式：C39H40O17  度：97.5%  兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Loroglossin  中文名：  分子式：C34H46O18  度：97.0%  兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose  中文名：6-O-對(duì)羥基苯甲酰葡萄糖  分子式：C13H16O8  度：98.0%  兔子凝血酶受體()ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Cerebroside D  中文名：腦苷脂D  分子式：C43H81NO9  度：96.5%  兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ethyl chlorogenate  中文名：綠原酸乙酯  分子式：C18H22O9  度：96.0%  兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人牙齦上皮細(xì)胞直銷兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  1068661-35-7  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19 

兔緊張素Ⅱelisa試劑盒   兔緊張素Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔緊張素Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     5-Benzyloxyindole  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Benzyl-1H-tetrazole  中文名：5-芐基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%

兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。