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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒紫外分光光度法
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號:50管/48樣
  • 貨號:BK-S01328
  • 發(fā)布日期: 2020-10-27
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-S01328
用途 產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 50管/48樣
純度 %
CAS編號
別名 NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒
分子式
是否進(jìn)口

基本信息:

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒紫外分光光度法

紫外分光光度法

50/48

BK-S01328

商品介紹:

測定意義
MDH EC1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDHTCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDHNADP-依賴的MDH,細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH,在真核細(xì)胞中,NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。

測定原理:

NAD-MDH催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。

特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛 產(chǎn)品僅用于科研
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
β-N-乙?;咸烟擒彰福∟AG)試劑盒(比色法)  3-Allylrhodanine  1457-47-2  中文名:3-烯丙基羅丹寧  分子式:C6H7NOS2 

β-(D3-H)測定試劑盒(酶比色法)  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式:C16H14O3 

α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Triptoquinone A  中文名:  分子式:C20H24O4 

α-巖藻糖苷酶(AFU)測定試劑盒(速率法)                    Xanthopurpurin  518-83-2  中文名:1,3-二羥基蒽醌  分子式:C14H8O4 

α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣              Atrazine  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5
生長激素   英文名稱:   growth hormone   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   HGH  Przewaquinone A  76843-23-7  中文名:紫丹參甲素  分子式:C19H18O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  ; 鼠尾草屬; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

生長分化因子-3   英文名稱:   growth differeiation factor 3   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GDF-3  3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  899822-97-0  中文名:  分子式:C17H25NO3  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

生長分化因子 -3(GDF-3)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     Nitrendipine  39562-70-4  中文名:尼群地平  分子式:C18H20N2O6 

生長分化因子 -15(GDF-15)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone  中文名:  分子式:C17H25NO3 

生化檢測試劑盒  3-Methylamino-1-(2-thienyl)-1-propanol  116539-55-0  中文名:  分子式:C8H13NOS  度:98.0%
4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名:  分子式:    Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)ELISA試劑盒

Clemastine fumarate  14976-57-9  中文名:富馬酸氯馬斯汀  分子式:C25H30ClNO5    rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

3-Aminopiperidine di  334618-23-4  中文名:  分子式:C5H14Cl2N2    CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲狀腺微粒體抗體規(guī)格:48T/96T

Sitagliptin phosphate  654671-78-0  中文名:無水磷酸西他列汀  分子式:C16H18F6N5O5P    線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次

4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名:  分子式:C8H6F2O3    Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒紫外分光光度法D-Tryptophan methyl ester   14907-27-8  中文名:  分子式:C12H15ClN2O2    rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid  6836-22-2  中文名:  分子式:C13H12O3    CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(MouseBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格:48T/96T

Dehydrotolvaptan  137973-76-3  中文名:  分子式:C26H23ClN2O3    細(xì)菌異化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

Tolvaptan  150683-30-0  中文名:托伐普坦  分子式:C26H25ClN2O3    rabbitEsadiol,E2ELISAKit兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Abiraterone acetate  154229-18-2  中文名:乙酸阿比特龍酯  分子式:C26H33NO2    豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL12B ELISA Kit
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

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