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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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nadp蘋果酸脫氫酶(nadh)測(cè)試盒微量法
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:國產(chǎn)
  • 型號(hào):100管/96樣
  • 貨號(hào):BK-S01329
  • 發(fā)布日期: 2020-10-27
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-S01329
用途 產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 %
CAS編號(hào)
別名 NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口


商品介紹:

測(cè)定意義
MDH (EC1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。

測(cè)定原理:

NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

基本信息:

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/96樣

BK-S01329

特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。產(chǎn)品僅用于科研
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
β-Sitosterol  83-46-5  中文名:β-谷甾醇  分子式:C29H50O    Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Thevetin B  27127-79-3  中文名:  分子式:C42H66O18    HumanEamoebahistolyticaAigenELISA試劑盒人內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名:  分子式:C21H28O3    組織PKCη激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Dregeoside A11  89020-11-1  中文名:  分子式:C55H88O22    HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  167958-89-6  中文名:  分子式:C29H48O2    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
生長(zhǎng)激素釋放多肽Ghrelin   英文名稱:   peptide hormone Ghrelin   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   Ghrelin  3-Methylami-(2-thienyl)-1-propa 中文名:  分子式:C8H13NOS  度:98.0%

生長(zhǎng)激素釋放多肽   英文名稱:   Human Growth Hormone Releasing Peptide   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GHRP  3-O-Benzyl estrone  858-98-0  中文名:3-O-芐基雌酚酮  分子式:C25H28O2

生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白 (P)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol  163397-38-4  中文名:  分子式:C19H20O12  度:97.5%  關(guān)鍵詞:

生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白   英文名稱:   GH-binding protein   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   P  vibo-Quercitol  488-76-6  中文名:  分子式:C6H12O5  度:%  關(guān)鍵詞:  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

生長(zhǎng)激素   英文名稱:   Human Growth Hormone   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   GH  3-O-Acetylenone hydrazone  中文名:3-O-乙酰基雄酮腙  分子式:C21H32N2O2  度:98.0%
4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名:  分子式:  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠酶2(CA-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名:  分子式:C20H26O4  度:%  關(guān)鍵詞:  紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名:  分子式:C9H14O4  度:%  關(guān)鍵詞:  千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠0脂酰絲酸(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名:  分子式:C8H6F2O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠膽堿0酸甘油酯(PC/CPG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
NADP蘋果酸脫氫酶(NADPMDH)測(cè)試盒微量法4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di  106261-49-8  中文名:甲磺酸伊馬替尼  分子式:C13H20Cl2N2O2    CLIAKitforATM(HumanAtaxiatelangiectasiamated)ELISAKit人擴(kuò)張性突變基因規(guī)格:48T/96T

4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  438056-69-0  中文名:  分子式:C10H12N2O2    線粒體復(fù)合物II蛋白共沉淀分析試劑盒5次

N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide  161596-47-0  中文名:  分子式:C11H9NO3    RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名:  分子式:C5H3ClO2S    豚鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit

Rivaroxaban  366789-02-8  中文名:利伐沙班  分子式:C19H18ClN3O5S    Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒


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