產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0059 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 腎;自發(fā)永生;Osborn BKMendel |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠腎細(xì)胞價(jià)格
簡稱:NRK
種屬:大鼠
來源:腎;自發(fā)永生;Osborn BKMendel
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0059
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞價(jià)格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid 中文名: 分子式:C14H11ClO3 EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml)
2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene 中文名: 分子式:C13H9ClOS 乙二醇 500ml
2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 中文名: 分子式:C10H14N2O6S3 Ethyleneglycol
2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate 中文名: 分子式:C50H93NO9 雄激素結(jié)合蛋白 英文名稱: Androgen Binding Protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ABP
2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol 中文名: 分子式:C42H85NO5 激活素A 英文名稱: Activin A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Activin A
小鼠血小板生長因子(mouse PDGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Mefenamic acid 中文名:甲滅酸 分子式:C15H15NO2
小鼠血小板生長因子 英文名稱: plateler-derived growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PDGF m-Nitrohydrocinnamic acid 1664-57-9 中文名: 分子式:C9H9NO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Momor-cerebroside I 中文名: 分子式:C48H93NO10
小鼠血小板生成素(mouse TPO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Neritaloside 中文名: 分子式:C32H48O10
小鼠血小板生成素 英文名稱: Thromboietin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TPO Ethyl 2-(3-cyano-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxylate 160844-75-7 中文名: 分子式:C18H20N2O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
3,3'-Sulfonyldianiline 599-61-1 中文名:3,3'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 谷胱甘肽過氧化物酶 英文名稱: glathione peroxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GSH-Px
1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene 3073-87-8 中文名:1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯 分子式:C26H20N2O2 谷胱甘肽過氧化物酶 英文名稱: glathione peroxidase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GSH-Px
Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane 105391-33-1 中文名:雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來基苯基)甲烷 分子式:C27H26N2O4 生長激素結(jié)合蛋白 (P) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Bisphenol P 2167-51-3 中文名:雙酚P 分子式:C24H26O2 半乳糖凝集素 -3(Galectin-3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
(+)-Noe's reagent 87248-50-8 中文名:(+)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 腦神經(jīng)相關(guān)生長蛋白 -43(GAP-43) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
大鼠腎細(xì)胞價(jià)格人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit ELISA. 96T/48T Capecitabine 中文名:卡培他濱 分子式:C15H22FN3O6
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigecycline 中文名: 分子式:C29H39N5O8
人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 77-60-1 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 毛地黃屬; 萬年蘭屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 77-60-1 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3
人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tigogenin 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。