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產(chǎn)品簡稱：P815細(xì)胞
中文名稱：小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：小鼠

來源：肥大細(xì)胞瘤；雄性；DBA/2

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：懸浮

單位:

貨號：E0227

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實驗提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Human exacellular signal regulated kinase (ERK) ELISA Kit 人細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  中文名：2-萘酚芐基醚  分子式：C17H14O 

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Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名：  分子式：C28H44O4 

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Human cytochrome P450c21A/21- hydroxylase (CYP21A) ELISA Kit 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒  2-Amino-9H-fluoren-9-one  3096-57-9  中文名：2-氨基-9H-芴-9-酮  分子式：C13H9NO
替拉替尼  17-AAG  質(zhì)量規(guī)格：HSP90 抑制劑,BR,進(jìn)分 大鼠膠原交聯(lián)(PYD)試劑盒 Rat pyridinoline,PYD ELISA Kit

鹽酸特拉唑嗪  Terazosin HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,二水合物 大鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒RatCollagenaseIELISAKit 96T/48T

睪酮,素  Testosterone   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA檢測試劑盒RatCollagenaseTypeIIELISAKit 96T/48T

睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Testosterone   質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA檢測試劑盒Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKIT 96T/48T

鹽酸丁卡因  Tetracaine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒 Rat glial cell line-derived neuroophic factor,GDNF ELISA KIT

鹽酸丁卡因（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tetracaine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定 大鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒 Rat keratinocyte aocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit

苯甲唑啉鹽酸鹽/鹽酸妥拉唑林  Tolazoline HCl  質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)口原裝 大鼠角化細(xì)胞生長因子(KGF)試劑盒 Rat Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit

托特羅定  Tolterodine Tartrate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,M受體(毒蕈堿型乙酰膽堿受體)拮抗劑 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA檢測試劑盒RatCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 96T/48T

托特羅定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tolterodine Tartrate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA檢測試劑盒RatDesmin,DesELISAKit 96T/48T

托吡酯  Topiramate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA檢測試劑盒RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 96T/48T
人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit  2''-O-Acetylsprengerinin C  1220707-33-4  中文名：  分子式：C46H72O17  度：%  關(guān)鍵詞：  麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4  度：98.0%   

人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒     3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C15H18ClNO3  度：98.0%

人轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TGF-β3 (ansforming Growth Factor β3) ELISA Kit                  3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名：  分子式：C21H16FNO 

人轉(zhuǎn)化生長因子β2elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  152628-02-9  中文名：  分子式：C19H20N4
P815細(xì)胞Folic acid  59-30-3  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6    兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISAKit              

Amprolium hydrochloride  137-88-2  中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4    兔6素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒  

Furosemide  54-31-9  中文名：  分子式：C12H11ClN2O5S    蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒  

Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate  429659-01-8  中文名：  分子式：C18H20N4O5    雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試劑盒  

8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  666816-98-4  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2    蛇毒因子(CVF)ELISA試劑盒
注意事項：
P815細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。