|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P64578 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
|
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
|
立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64578 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit ELISA. 96T/48T Sertaconazole 中文名：舍他康唑 分子式：C20H15Cl3N2OS
豬細(xì)胞色素氧化酶（CC0）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Shikimic acid 中文名：莽草酸 分子式：C7H10O5 度：98.0%
豬細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Shikimic acid 中文名：莽草酸 分子式：C7H10O5
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Shikimic acid 138-59-0 中文名：莽草酸 分子式：C7H10O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 莽草; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit ELISA.
96T/48T Tenuifoliside
A 139726-35-5 中文名：遠(yuǎn)志蔗糖酯A 分子式：C31H38O17
CL-0405NCI-H716(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2雷特格韋質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRRaltegravir
羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株，293001A細(xì)胞 NCI-H596 [H596](細(xì)胞)雷帕霉素/西羅莫司質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Rapamycin(Sirolimus)
肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520氯硝柳胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRNiclosamide
HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氯硝柳胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Niclosamide
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0911環(huán)丙沙星質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Ciprofloxacin
腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)Forskolin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
B16F10細(xì)胞，小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞;hFOB 1.19黃藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)Palmatine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CCL17 Protein Human 重組 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白鹽酸西那卡塞；鹽酸甲狀旁腺激素Cinacalcet HCl,AMG073質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
SHG-44 (細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 黃藤素Palmatine質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR
胚;MRC-5鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶Pronase E質(zhì)量規(guī)格：BR，4000u/mg,進(jìn)分
Periplocoside N
中文名： 分子式：C27H44O6 雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Periplocoside M 中文名：北五加皮苷M 分子式：C34H52O9 雞球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Periplocoside F 中文名： 分子式：C63H104O23 雞球蛋白A(IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Periplocogenin 中文名： 分子式：C28H42O6 中文名稱 方法 規(guī)格
Periplocin 中文名：杠柳毒苷 分子式：C36H56O13 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
