產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63960 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
貓(FIP)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63960 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠細(xì)胞表面分子CD100 英文名稱: Mouse cluster of differeiation 100 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CD100 Mannioside A 1038922-95-0 中文名: 分子式:C39H62O13
小鼠戊糖素elisa試劑盒 小鼠戊糖素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠戊糖素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠戊糖素試劑盒、小鼠戊糖素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 L-Ascorbic acid 50-81-7 中文名:L-抗壞血酸 分子式:C6H8O6
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 m-Anisic acid 中文名:間茴香酸 分子式:C8H8O3
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T Isodiospyrin 20175-84-2 中文名: 分子式:C22H14O6 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 細(xì)胞毒活性; 柿屬; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 m-Anisic acid 586-38-9 中文名:間茴香酸 分子式:C8H8O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
HCM Pellet 類心肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1
mio.cells 成纖維細(xì)胞-新生兒總RNAHDF-n
NAN-BOC-O-芐基-L-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98N-BOC-O-Benzyl-L-serine
T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mLBOC-L-蘇氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBoc-Thr-OH
THPO Others Human Thrombopoietin / THPO / TPO CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 試亞鐵靈質(zhì)量規(guī)格:ARFerroin indicator solution
巨噬細(xì)胞生長添加物MGS鈣紅,乙二醛縮雙(鄰氨基酚)質(zhì)量規(guī)格:AR;98%Glyoxal-bis(2-hydroxyanil)
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-1 正常肝細(xì)胞,L-02細(xì)胞 T24(膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞)羥基萘酚藍(lán)質(zhì)量規(guī)格:金屬滴定指示劑Hydroxynaphthol blue
U-2 OS(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物Methyl
4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
成纖維細(xì)胞裂解物HPrFL異丙基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質(zhì)I)Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物(吡羅昔康雜質(zhì) K)Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6異丙基 4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質(zhì) L)Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL沙卡林N-(2-醋酸異丙基酯)(吡羅昔康雜質(zhì) F)Saccharin N-(2-Acetic Acid
Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Tetrahydrolachnophyllum lactone 56407-87-5
中文名: 分子式:C10H14O2 度:90.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Tetraethyl ranelate 58194-26-6 中文名: 分子式:C20H26N2O8S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抑制素B(INH-B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracycline 60-54-8 中文名:四環(huán)素 分子式:C22H24N2O8 度:97.0% 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracaine 136-47-0 中文名:鹽酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracaine 94-24-6 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time
PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
貓(FIP)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR