產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63898 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63898 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠皮質 英文名稱: Mouse Coicosterone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CO Chrysophanol 8-O-glucoside 中文名: 分子式:C21H20O9 度:97.5%
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furosemide 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S 度:98.0%
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISAKit ELISA. 96T/48T Ergosterol 中文名:麥角甾醇 分子式:C28H44O
小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furazolidone 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5 度:98.0%
小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒 小鼠牛血清白蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠牛血清白蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠牛血清白蛋白試劑盒、小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Ganciclovir 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4
PC-3M 1E8細胞,細胞高轉移亞系 大鼠細胞,MMQ細胞 扁桃體上皮細胞HTEpiC氨己1酸質量規(guī)格:>99%Vigabatrin
HHCC(細胞) 5×106cells/瓶×2O-去甲文拉法辛(D,L)質量規(guī)格:>98%O-Desmethylvenlaine(DL)
293(胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H019上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL 內根殼細胞RNAHHIRSC miRNA5 μg羥乙基纖維素(20000~30000 mpa.s)質量規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.sHydroxyethyl Cellulose
CM-R119大鼠晶狀體上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL羥乙基纖維素(5500-6500 mpa.s)質量規(guī)格:粘度5500-6500 mpa.sHydroxyethyl Cellulose
RIOK1 Others Human RIOK1 / RIO kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 羥乙基纖維素(40~60 mpa.s)質量規(guī)格:粘度40~60 mpa.sHydroxyethyl
Cellulose
SFPAC-1細胞,*癌細胞 舌癌細胞系,Tca8113-P60細胞
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2二苯并-15-冠5-(>95.0%(GC))Dibenzo-15-crown 5-Ether質量規(guī)格:>95.0%(GC)
J82(細胞) 5×106cells/瓶×2二苯并-21-冠7-(>96.0%(GC))Dibenzo-21-crown 7-Ether質量規(guī)格:>96.0%(GC)
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小上皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml4'-甲酰苯并-15-冠-5-(>98.0%(GC))4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether質量規(guī)格:>98.0%(GC)
腦膜細胞裂解物HMCL4'-甲酰苯并-18-冠-6-(>98.0%(GC))4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether質量規(guī)格:>98.0%(GC)
CCL21 Others Human CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4,7,13,21,24-六氧雜-1,10-二氮雜雙環(huán)[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T))4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane質量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4-
(pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine 152460-09-8 中文名: 分子式:C16H13N5O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole NO 中文名: 分子式:C16H21N3O4S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠胃泌酸調節(jié)素(OXM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-(2-Hydroxyethyl)-3-(4-nitrophenyl)propylamine 130634-09-2 中文名: 分子式:C11H16N2O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠胃泌素(GT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
N-(2,6-Dimethylphenyl)-2-piperidinecarboxamide 27262-40-4 中文名: 分子式:C14H20N2O 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit ELISA. 96T/48T
N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide 161596-47-0 中文名: 分子式:C11H9NO3 度:98.0% 關鍵詞: 中文名稱 方法 規(guī)格
高致病性豬藍耳病病毒(PRRSV-M)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。