產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64505 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
花生源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64505 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
植物維生素K1elisa試劑盒 植物維生素K1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 植物維生素K1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:植物維生素K1試劑盒、植物維生素K1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 中文名:磺胺間甲氧嘧啶鈉 分子式:C11H11N4NaO3S
植物維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Tricetyl fingolimod 中文名: 分子式:C25H39NO5 度:98.0%
植物維生素K1(VK1)ELISAKit ELISA. 96T/48T Troxerutin 中文名:曲克蘆丁 分子式:C33H42O19
植物維生素Eelisa試劑盒 植物維生素E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 植物維生素E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:植物維生素E試劑盒、植物維生素E elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Triethyl 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0%
植物維生素E(VE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Tricetyl fingolimod 中文名: 分子式:C25H39NO5
CM-R105大鼠神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL重1酸長(zhǎng)春瑞賓(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Vinorelbine
Tartrate
CD226 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD22 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 伏立康唑質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRVoriconazole
小鼠腎小管上皮細(xì)胞MREpiC加拉銨(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRGallamine triethiodide
DU-145細(xì)胞,細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,BC3H1細(xì)胞 肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞HPAFD-氨基葡萄糖硫酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>96%,BRGlcN-2S, D-Glucosamine-2-sulfate salt
HLF-a(肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2葡萄糖-6-1酸脫氫酶質(zhì)量規(guī)格:酶活:>200 NADP units/mg,BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase
男性正常細(xì)胞;Hs68多尼培南Doripenem 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一水合物
SIRP-BETA Others Mouse 小鼠 SIRPB1A / SIRP beta 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸多沙普侖Doxapram 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
HCCLM3 高轉(zhuǎn)移細(xì)胞鹽酸多沙普侖(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxapram 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
AAV-293胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line AAV-293 DMEM+10%FBS琥珀酸多西拉敏Doxylamine succinate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP grade
TNF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A /
Cachectin 蛋白琥珀酸多西拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)Doxylamine
succinate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Dioxopromethazine 中文名:鹽酸二氧丙嗪 分子式:C17H21ClN2O2S 豬生長(zhǎng)抑素elisa試劑盒 豬生長(zhǎng)抑素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬生長(zhǎng)抑素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬生長(zhǎng)抑素試劑盒、豬生長(zhǎng)抑素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Diosgenin 中文名:薯蕷皂苷元 分子式:C27H42O3 豬水泡毒(VSV)*試劑盒(-PCR法) 48T
Dioscin 中文名:薯蕷皂苷 分子式:C45H72O16 病毒(PTGV)*試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
Dinitolmide 中文名:二硝托胺 分子式:C8H7N3O5 病毒(PTGV)*試劑盒(-PCR法) 48T
Dimetridazole 中文名:二甲硝咪唑 分子式:C4H5N3O2 水泡病毒(SVDV)*試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time
PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
花生源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR