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公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

CL-0012A172(人腦細胞)5×106cells/瓶×2N-叔丁氧羰基-D-亮酸，英文名或英文縮寫：BOC-D-Leucine，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

ART3 Others Human 人 ART3 人細胞裂解液 (陽性對照) β-羥脫氫酶 β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase (≥20... 9028-38-0 10UN 通用試劑

心肌細胞生長添加物CMGS全-d2 FORMcLDqHYDq-D2 1664-98-8

ISK (Ishikawa)細胞，人內(nèi)膜癌細胞 小鼠小細胞,Bv-2細胞 心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Enrofloxacin諾沙星500KUI型，95%

GH3(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×2125572-95-4反式-1，2-環(huán)己四乙酸TRANS-1,2-DIAMINOCYCLOHEXANE-N,N,N',N'-TETRAACETIC ACID MONOHYDRATE
表皮角質(zhì)細胞cDNAHEK cDNA培美曲塞-15N,13C5Pemetrexed - Labeled 15N,13C5質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 細胞裂解液 (陽性對照) N-硝基-L-精氨酸甲酯N'-Nitro-L-arginine-methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%

脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格：>98%

ZA1細胞，轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]AEBSF絲氨酸抑制劑AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白AEBSF(進分)AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%,進分TCI A2215
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2酸性紫49Acid Violet 49質(zhì)量規(guī)格：IND,進分

HGF Others Mouse 小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 細胞裂解液 (陽性對照) 皂黃Metanil yellow質(zhì)量規(guī)格：AR

原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml橙黃G；酸性橙10Orange G質(zhì)量規(guī)格：BS

HUVEC(原代)細胞，臍內(nèi)皮細胞 HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細胞,TC-1細胞 雪旺細胞總RNAHSC NA橙黃ⅡOrangeⅡ質(zhì)量規(guī)格：AR

QGY-7703(細胞) 5×106cells/瓶×2柯衣定Chrysoidin質(zhì)量規(guī)格：AR
HEp-2細胞，喉表皮樣癌細胞 人食管鱗癌,KYSE70細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1丹曲林鈉半七水合物Dantrolene,  Salt Hemiheptahydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A33-甲氧基地氯雷他定3-Methoxy Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 異地氯雷他定Iso Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)N-甲基地氯雷他定N-Methyl Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 )5-羥基地氯雷他定5-Hydroxy Desloratadine質(zhì)量規(guī)格：美國進口