產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64672 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64672 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time
PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量:10毫克
CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細(xì)胞)5×106cells/瓶×2苯扎溴銨 Benzyldodecyldimethylammonium bromide,... 7281-4-1 1G 通用試劑
AKT3 Others Human 人 AKT3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異務(wù)迷;二異務(wù)迷 IsocMyl qtqr;DiisocMy qtqr;3-Mqthyl-1-(γ-Mqthyl butoxy)butcnq;1,1′-Oxybis[3-Mqthylbutcnq];lsopqntyl qtqr244-01-4
SMCFectagen? 平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒H-半胱酸-甘酸-OH,英文名或英文縮寫:Cys-Gly,級別:BR,98%,規(guī)格:100克
LoVo細(xì)胞,人細(xì)胞 HEK293,人胚腎上皮細(xì)胞,293A細(xì)胞 腎動脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)(*)(易)potewwium perchlorate
腦平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸BOC-L-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RBP4 Others Canine 狗 RBP4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-絲氨酸N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠心肌成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLBOC-L-苯丙氨酸Boc-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
35.1雜交瘤細(xì)胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSBOC-甘氨酸Boc-Glycine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)BOC-L-異亮氨酸Boc-Ile-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
小氣道上皮細(xì)胞生長添加物SAEpiCGS脫水長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Anhydrovinblastine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
MIF Others Human MIF / GLIF 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 長春新堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Vincristine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CRFK 貓腎上皮細(xì)胞硫酸金雀花堿;硫酸司巴?。?biāo)準(zhǔn)品)Sparteine sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL高烏甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Lappaconitine質(zhì)量規(guī)格:滴定法≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HET-1A, 食管上皮細(xì)胞番茄紅素(標(biāo)準(zhǔn)品)Lycopene質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,標(biāo)準(zhǔn)品,充氮氣保護(hù)
MS751 人頸表皮癌細(xì)胞度洛西汀Duloxetine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NCI-H661人大細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-羥基度洛西汀4-Hydroxy Duloxetine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標(biāo)簽)5-羥基-6-甲氧基度洛西汀鹽酸鹽5-Hydroxy-6-methoxy Duloxetine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人胚肺二倍體細(xì)胞;2BS 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-甲基度洛西汀N-Methyl Duloxetine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞總RNAHCPEpiC NA4-羥基度洛西汀β-D-葡萄糖苷酸4-Hydroxy Duloxetine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口