產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P63479 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
大腸桿菌stx2基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63479 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ambrisentan 177036-94-1 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子elisa試劑盒 豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒、豚鼠表皮生長(zhǎng)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Ambrisentan 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Altrenogest 中文名:烯丙孕素 分子式:C21H26O2 度:98.0%
豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T alpha-Terthienylmethanol 13059-93-3 中文名: 分子式:C13H10OS3 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
豚鼠白細(xì)胞間介素 4 英文名稱:
Guinea pig Ierleukin 4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IL-4
Aloin 8015-61-0 中文名:蘆薈苷 分子式:C21H22O9 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 蘆薈; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
FGF14 Protein Human 重組 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)DL-丙氨酰-DL-丙氨酸DL-Ala-DL-Ala質(zhì)量規(guī)格:0.97
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸微內(nèi)皮細(xì)胞HIMECN-乙酰-DL-谷氨酸Ac-DL-Glu-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
表皮角質(zhì)細(xì)胞-胎兒HEK-fDL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸DL-a-Aminoadipic acid質(zhì)量規(guī)格:>97%,混旋
VIPR2 Others Human VIPR2 / VPAC2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水DL-Cysteine·HCl·H2O質(zhì)量規(guī)格:0.98
兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTFDL-胱氨酸鹽酸鹽DL-Cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
EL4.IL-2 小鼠瘤細(xì)胞腺苷激酶抑制劑Adenosine
Kinase Inhibitor質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-氨基腺苷2-Amino Adenosine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B55'-乙基酰胺基-2',3'-亞異丙基腺苷5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 別嘌醇核苷Allopurinol riboside質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CM-M069小鼠腎成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰兩性霉素BN-Acetyl Amphotericin B質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Formestane
中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 小鼠IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
4-Chlorotestosterone acetate 中文名:醋酸氯 分子式:C21H29ClO3 度:98.0% 小鼠IgM(mouse IgM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Estra-4,9-diene-3,17-dione 中文名:甲基雙烯雙酮 分子式:C18H22O2 度:98.0% 小鼠白介素-1a(mouse IL-1a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
大腸桿菌stx2基因PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Methoxydienone 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2 度:98.0% 小鼠白介素-1b(mouse IL-1b) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Methasterone 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0% 小鼠IgE 英文名稱: immunoglobulin E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgE
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。