產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7389 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細胞裂解液 (陽性對照) 人參皂甙Rb3,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rb3,級別:BR,規(guī)格:25克
人胚肺二倍體細胞;HEL-26-溴-1-己1 6-Bromo-1-hqxqnq 692-47-8
大鼠細胞;IR983F 腺癌細胞,Caco-2細胞 WEHI 164細胞,鼠纖維細胞系乙二茶堿,英文名或英文縮寫:Aminophylline hydrate,級別:AR,規(guī)格:25克
GBC-SD, 人細胞 Human氫氧化shēng huà shì jì容量:25克
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細胞裂解液 (陽性對照) (2-羥基磺酸))
rCF, 大鼠成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%
人結(jié)直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶銀Silver Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31,BR
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 磺胺嘧啶銀(標(biāo)準(zhǔn)品)Silver Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)細胞;T84辛伐他汀 Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細胞培養(yǎng)級
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀,辛伐他?。?biāo)準(zhǔn)品)Simvastatin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) Gold(III)chloride三錄化金1克特,97%
人胚;HFL1言醋布比卡應(yīng) Bupivcccinq xy7nochloridq 73360-24-0
狗腎細胞;Super Tube 胚胎成纖維細胞,3T6-Swiss albino細胞 Hed68細胞,果子貍腎上皮細胞橄欖油 Olive oil (highly refined, low acidity) 8001-25-0 100ML 通用試劑
人胚;WI-38 [WI38]EriochromeblueblackR依來藍R500克100s/盒
HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) L-Histidine 5g/10g Sigma分裝
動物源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 Human(-)-Blebbistatin(-)-Blebbistatin質(zhì)量規(guī)格:>98%
CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細胞裂解液 (陽性對照) 奈達鉑;順糖氨鉑Nedaplatin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))1,10-Phenanthroline-5,6-dione質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKINTPP(=四苯基卟啉)TPP (=Tetraphenylporphyrin) 質(zhì)量規(guī)格:銅用超高靈敏分光光度試劑