產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63304 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
腺病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63304 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
兔阿霉素(ADR)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 中文名: 分子式:C22H25N3O2
兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Aminoindole 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
兔S100b 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 4-Aminosalicylic acid 中文名:4-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3
兔S100A6蛋白 英文名稱: Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: S100A6 4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 4551-69-3 中文名:4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2 度:98.0%
兔P-選擇素(rabbit
P-selectin) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進口分裝
5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole
116856-18-9 中文名: 分子式:C7H9N3O3
DH82 狗腎惡性癥細胞順式-5,8,11,14,17-二十碳五1酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic acid
KLK4 Others Human KLK-4 / Kallikrein-4 細胞裂解液 (陽性對照) Celite 硅藻土 545(助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒)質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,碳酸鈉處理,通量煅燒Celite 545
SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞;hFOB 1.19十五氟辛酸(約5mmol)[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)
TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 十五氟辛酸,高等級[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑IPC-PFFA-8 HG
CM-H038直平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL9,10-二甲氧基蒽-2-磺酸鈉鹽[離子對色譜級]質(zhì)量規(guī)格:用于氨類的熒光離子對試劑IPA-DAS
CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白甲鈷胺Mecobalamin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RL95-2(內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CGB5 細胞裂解液 (陽性對照) 右旋酮洛芬氨丁三醇(S)-Ketoprofen trometamol質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
高轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M IE8右旋酮洛芬氨丁三醇(標準品)(S)-Ketoprofen trometamol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
CDH1 Others Human E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 細胞裂解液 (陽性對照) 植物凝膠(Sigma)Phytagel質(zhì)量規(guī)格:進分;SigmaP8169
CM-R050大鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基100mL右旋酮洛芬(S)-(+)-Ketoprofen質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0% 兔中性粒細胞彈性蛋白酶(rabbit
NE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Isodiospyrin 中文名: 分子式:C22H14O6 度:97.5% 兔神經(jīng)生長因子(rabbit NGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate 中文名: 分子式:C10H12O4 度:% 兔神經(jīng)營養(yǎng)素3(rabbit -3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone 中文名: 分子式:C24H32O7 度:98.0% 兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
腺病毒PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)α-Tocopherolquinone 中文名: 分子式:C29H50O3 度:98.0% 兔脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit A-FABP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。