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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子p65(mouse NF-kBp65)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Diclazuril  中文名：地克珠利  分子式：C17H9Cl3N4O2  度：99.0%

小鼠核轉(zhuǎn)錄因子   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF-κB  Pitavastatin ethyl ester  中文名：  分子式：C27H28FNO4 

小鼠核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dibucaine   中文名：鹽酸地布卡因  分子式：C20H30ClN3O2  度：98.0%

小鼠核因子-κB亞基ρ65親和肽   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-Κb ρ65   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NF-Κb ρ65  Pitavastatin ethyl ester  167073-19-0  中文名：  分子式：C27H28FNO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dibucaine  1961/12/1  中文名：鹽酸地布卡因  分子式：C20H30ClN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雙乙酸鈉 diacetate質(zhì)量規(guī)格：>99%

管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物Glycyl-L-glutamine monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

BTC Others Cynomolgus 食蟹猴 BTC / Betacellulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基多沙唑嗪6-Hydroxy Doxazosin質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino7-羥基多沙唑嗪7-Hydroxy Doxazosin質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

16HBE細(xì)胞，上皮細(xì)胞 化學(xué)轉(zhuǎn)化小鼠鼻咽上皮細(xì)胞,TMNE細(xì)胞 CL-0178OVCAR-3(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2恩替卡韋 Labeled d2, 15N, 13CEntecavir Labeled d2, 15N, 13C質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
MDA-MB-231(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 噻托溴銨一水合物Tiotropium bromide hydrate 質(zhì)量規(guī)格：度>99%

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1鹽酸胺酮Amiodarone HCl質(zhì)量規(guī)格：purity>99.5%,EP6,BR

CALR Others Human  CALR / Calreticulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸胺酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Amiodarone HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)阿莫曲普坦蘋果酸鹽Amotriptan malate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

Ramos細(xì)胞，血細(xì)胞瘤細(xì)胞系 615小鼠前瘤株,Fc細(xì)胞 *成纖維細(xì)胞-心房裂解物HCF-aa L阿糖腺苷Vidarabine/Ara-A質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Amlexanox ethyl ester  68301-99-5  中文名：  分子式：C18H18N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞色素C(mouse Cytochrome C)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Amlexanox  68302-57-8  中文名：氨來呫諾  分子式：C16H14N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠類生長因子結(jié)合蛋白-1(mouse IGFBP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Amitriptyline   549-18-8  中文名：鹽酸阿米替林  分子式：C20H24ClN  度：98.0%      小鼠類生長因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

肺吸蟲PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。