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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子調(diào)節(jié)蛋白elisa試劑盒   兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒、兔子調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Acid Black 1  1064-48-8  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Acyclovir  59277-89-3  中文名：阿昔洛韋  分子式：5O3 

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Acetylatractylodinol  61582-39-6  中文名：乙酰蒼術(shù)素醇  分子式：C15H12O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  抗菌; ; 蒼術(shù); 聚乙炔; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Hydroxy-2-methylanthraquinone 6268/9/3  中文名：1-羥基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C16H15F2NO4  度：98.0%
HFT-8810(胎兒胸腺細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2 奇異變形桿菌BOC-L-脯氨酸Boc-Pro-OH質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

腦平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-L-色氨酸Boc-Trp-OH質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

KIAA1279 Others Human  KIAA1279 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Boc-L-β-高丙氨酸Boc-L-β-homoalanine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03Boc-L-beta-谷氨酸5-芐酯Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl ester質(zhì)量規(guī)格：0.98

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA 瘤細(xì)胞，P388D1細(xì)胞 IF細(xì)胞，兔成骨C細(xì)胞Fmoc-L-β-谷氨酸5-叔丁基酯Fmoc-β-homoaspartic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM0501 滑膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL壬酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))Nonoic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC)

小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基SAEpiCM萘-D8(標(biāo)準(zhǔn)品)Naphthalene-d8質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

CLEC10A Others Human  CLEC10A / MGL1 / CD301 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二十五烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))Pentacosane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)

大鼠肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9,10-二甲基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)9,10-Dimethylanthracene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

TOV21G細(xì)胞 Human ovarian cancer cell line TOV21G 1640+10FBS%9,10-二苯基蒽(標(biāo)準(zhǔn)品)9,10-Diphenylanthracene質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
Desloratadine  中文名：脫羧氯雷他定  分子式：C19H19ClN2  度：98.0%  小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 ADI

5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  中文名：  分子式：C7H9N3O3  度：98.0%  小鼠類樣生長因子 -1 (mouse IGF-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  中文名：  分子式：C5H9N3O  度：98.0%  小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

霍亂弧菌CTX基因PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名：  分子式：C6H5N3  度：98.0%  小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  

Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%  小量DNA產(chǎn)物化試劑盒   Small DNA product purification kit