產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7347 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Vibrio choleraeO139
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
SGC-7901 人細胞R-聯(lián)萘酚1酸酯質量規(guī)格:>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤質量規(guī)格:>97%,原裝進口2,6-Dichloropurine
mCF, 小鼠成纖維細胞2,4-二氯喹唑啉質量規(guī)格:>98%2,4-Dichloroquinazoline
人胚腎上皮細胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL9-氯甲基蒽質量規(guī)格:>98%,進口原裝9-(Chloromethyl)anthracene
人纖維細胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))質量規(guī)格:>97.0%(GC)1-Bromoanthracene
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸伐昔洛韋/鹽酸萬乃洛韋(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Valacyclovir HCl
人表皮色素細胞-淺色素總RNAHEM-l NA維庫溴銨質量規(guī)格:>99%,BRVecuronium Bromide
RT4細胞,細胞 人胚肺細胞,MRC-5細胞 原代平滑肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml維庫溴銨(標準品)質量規(guī)格:>99%,標準品Vecuronium Bromide
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4GDPNa2;5’-二1酸鳥苷二鈉質量規(guī)格:>90%,BRGDP Di Salt
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) SU11274質量規(guī)格:>98%,選擇性的Met抑制劑SU-11274
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細胞裂解液 (陽性對照) 油醇,英文名或英文縮寫:Terpineol,級別:AR,99%,規(guī)格:500克
小鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL三拂磺醋鋇 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7
P9小鼠骨髓基質細胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS化四甲基,英文名或英文縮寫:Tetrametxylammonium iodide,級別:AR,98%,規(guī)格:1克
白細胞介素-12超家族β-酸乙酯鹽酸鹽10克RT
SW 1353(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠細胞)pxenmetxosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361
霍亂弧菌139型探針法熒光定量PCR試劑盒ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)1,5-二溴蒽(>97.0%(GC))1,5-Dibromoanthracene質量規(guī)格:>97.0%(GC)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))1,8-Diiodoanthracene質量規(guī)格:>98.0%(GC)
獼猴肺細胞;MML29-酮基利培酮9-Keto Risperidone質量規(guī)格:美國進口
人氣管平滑肌細胞 (HTSMC)( 5×105 )6-去氟-6-羥基利培酮6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone質量規(guī)格:美國進口
CL-0260BC-021(人癌細胞)5×106cells/瓶×27-羥基利培酮7-Hydroxy Risperidone質量規(guī)格:美國進口