產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7327 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
伊氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:伊氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trypanosoma evansi
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞地塞米環(huán)氧水解物質(zhì)量規(guī)格:>98%8DM
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4甲基潑尼質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMeprednisone
HEC-1A, 人細(xì)胞系甲基潑尼(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Meprednisone
人細(xì)胞;SF126 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿普斯特;CC10004質(zhì)量規(guī)格:>98%,PDE4和TNF-α抑制劑Apremilast;CC-10004
食管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:鑒別TRISTEARIN
TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯尼達(dá)明質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLonidamine
小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL洛匹那韋質(zhì)量規(guī)格:>99%Lopinavir
WEHI-231小鼠B細(xì)胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cyclosporine A
IL23 Protein Mouse 重組小鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白鹽酸噻氯匹定質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRTiclopidine HCl
T/G HA-VSMC(人平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 B16(小鼠色素瘤細(xì)胞)鹽酸噻氯匹定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ticlopidine HCl
M4e細(xì)胞,人細(xì)胞 人腦膠質(zhì)細(xì)胞株(正常),HEB細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A5′-CDP,2Na5-胞嘧啶核苷二嶙酸二鈉鹽1克BR,99%
Ca Ski(人上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鄰基本同 2'-Mqthylccqtophqnonq 277-16-
FCAR Others Human 人 FCAR / CD89 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-Nonanoll庚基甲基5克CP,98%
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1L-LYSINEMONOHYDRATEL-賴酸,一水蛋白組學(xué)級(jí)500G39665-12-8COLD
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 17832-28-91,49,4-putene7iol vinyl
伊氏錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒腦平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸BOC-L-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-絲氨酸N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠心肌成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLBOC-L-苯丙氨酸Boc-L-phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
35.1雜交瘤細(xì)胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSBOC-甘氨酸Boc-Glycine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)BOC-L-異亮氨酸Boc-Ile-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。