產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7302 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trichomonas stableri
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學(xué)級5MG119942-99-3Frozen
人結(jié)膜成纖維細(xì)胞總RNAHConF NA沒食子醋兒茶速沒食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9
CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1
豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1普魯蘭酶1克2~8℃,避光
A-673細(xì)胞,橫紋肌瘤細(xì)胞 Hela細(xì)胞耐藥亞株,Hela/DDP細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1Betaine 50g/100g/1kg原裝 Sigma B2629
VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細(xì)胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBSβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPentaacetyl-β-D-galactopyranose
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (His 標(biāo)簽)人造沸石質(zhì)量規(guī)格:Tech GradePermutit
LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHL/IU [ CHL-11 ](中國倉鼠肺細(xì)胞)酚肽二1酸四鈉(>96%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>96%,BCPhenolphthalein diphosphate tetra salt
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml吩噻嗪(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPhenothiazine
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 秦皮甲素質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BREsculin
細(xì)胞名稱 種屬8-羥基鹽shēng huà shì jì容量:RT100克
JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4,4-亞基三本晴 4,4',4''-Mqthylidqnqtrisbqnzonitnilq 11340-31-6
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich4-甲基傘形酮酰-β-D-糖苷shēng huà shì jì容量:2~8℃5克
人虹狀體上皮細(xì)胞 (HIPEpiC)( 5×105 )Paraffinoil石蠟油100克AR,99%
CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL73-24-5腺嘌呤;胰堿;腺堿;腺尿環(huán);6-基尿環(huán)Adenine;6-AMino-1H-purine;6-AMino-3H-purine;6-AMino-9H-purine;1H-Purine-6-aMine;1,6-Dixy7no-6-iMinopurine;3,6-Dixy7no-6-iMinopurine
斯氏毛探針法熒光定量PCR試劑盒VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸N6-Cbz-L-Lysine質(zhì)量規(guī)格:98%,BR
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLDL-賴氨酸鹽酸鹽DL-Lysine·HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
SGC-7901人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSDL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格:0.99
人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 RattusDL-焦谷氨酸DL-Pyroglutamic acid質(zhì)量規(guī)格:0.98
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。