產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7294 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:巴布亞旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Trichinella papuae
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
巴布亞旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-二乙基亞硝,英文名或英文縮寫:N-nitnosodietxylamine,級別:BR,98%,規(guī)格:5克
人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽 2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑
TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0
VERO細(xì)胞衍生株;SVP偶氮脒類引發(fā)劑V50shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
CGM1細(xì)胞,EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS174T細(xì)胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL1,8-桉樹腦Cineole
WI-38AV13細(xì)胞,人SV-40轉(zhuǎn)化 大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞,VSMC細(xì)胞 CL-0010786-O(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫普羅寧(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Tiopronin
SP2/0(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2多索茶堿質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDoxofylline
HDBEC-c 人類皮膚血內(nèi)皮細(xì)胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)多索茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Doxofylline
心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2核糖核酸鈉鹽(酵母)100克
FIGF Others Mouse 小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,5-吡嗪二羧醋 2,5-PYRcZINqDICcRBOXYLIC cCID DIHYDRcTq 0269-63-3
人胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL低聚果糖100克
RD細(xì)胞,人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 屎腸球菌 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich1,2-本500克
CCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 (His 標(biāo)簽)446-48-02-扶溴芐2-Fluorobenzyl bromide
巴布亞旋毛蟲探針法熒光定量PCR試劑盒NCI-H661細(xì)胞,大細(xì)胞細(xì)胞 人細(xì)胞,HONE1細(xì)胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2D-胱氨酸D-Cystine質(zhì)量規(guī)格:0.98
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1D-阿拉伯糖醇D(+)-Arabitol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米吐爾(>98%,BC)Metol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸吡哆醛Pyridoxal hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硅油Silicone oil質(zhì)量規(guī)格:BR