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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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粗球孢子菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63340
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-06-24
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63340
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

粗球孢子菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63340

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Aminoindole  5192-03-0  中文名:5-氨基吲哚  分子式:C8H8N2 

兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminoindole  中文名:5-氨基吲哚  分子式:C8H8N2  度:98.0%

兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  5-Aminoindazole  19335-11-6  中文名:5-氨基吲唑  分子式:C7H7N3  度:98.0%   

兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Aminoindazole  中文名:5-氨基吲唑  分子式:C7H7N3 

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  中文名:4-苯甲?;?span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2  度:98.0%
COL2A1 Others Human  COL2A1 (aa 1242-1487) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-氮雜-12-4-(>98.0%(T))1-Aza-12-crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-764'-乙酰苯并-15--5-(>95.0%(GC))4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)

Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二羥基萘(>98%,BR)1,3-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

胎兒成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)1,4-3,6-雙脫水甘露醇(>98%,BR)1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

魚源細(xì)胞 細(xì)胞,Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞 JAR(胎盤絨毛癌細(xì)胞)1,4-環(huán)己二酮(>98%,BR)1,4-Cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木犀草素Luteolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC97%,BR

成纖維細(xì)胞-胎兒RNAHEF-f miRNA5 μg木犀草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Luteolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 熊果酸Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC85%,BR

THP-1 單核細(xì)胞細(xì)胞熊果酸;烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0418QGY-7703(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2香葉木素Diosmetin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
Ethyl rutinoside  中文名:蕓香糖乙苷  分子式:C14H26O10  度:98.0%  兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔子催乳素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  

18-Hydroxytritriacontan-16-one  中文名:  分子式:C33H66O2  度:98.0%  兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

粗球孢子菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Mannitol  中文名:甘露醇  分子式:C6H14O6  度:98.5%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Phomaligol A  中文名:  分子式:C14H20O6  度:兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

ucralose  中文名:三氯蔗糖  分子式:C12H19Cl3O8  度:99.0%  兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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