產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63340 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
粗球孢子菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63340 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-Aminoindole 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Aminoindazole 19335-11-6 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3
兔去甲上腺素(NA)ELISAKit ELISA.
96T/48T
4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone 中文名:4-苯甲?;?span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮 分子式:C17H14N2O2 度:98.0%
COL2A1 Others Human COL2A1 (aa 1242-1487) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-氮雜-12-冠4-(>98.0%(T))1-Aza-12-crown 4-Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO-764'-乙酰苯并-15-冠-5-(>95.0%(GC))4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二羥基萘(>98%,BR)1,3-Dihydroxynaphthalene質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
胎兒成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,4-3,6-雙脫水甘露醇(>98%,BR)1,4-3,6-Dianhydro-D-mannitol質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
魚源細(xì)胞 細(xì)胞,Hep 3B2.1-7[Hep 3B;Hep-3B;Hep3B]細(xì)胞 JAR(胎盤絨毛癌細(xì)胞)1,4-環(huán)己二酮(>98%,BR)1,4-Cyclohexanedione質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CES2 Others Mouse 小鼠 CES2 / Carboxylesterase-2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 木犀草素Luteolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
成纖維細(xì)胞-胎兒RNAHEF-f miRNA5 μg木犀草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Luteolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CXCL12 Others Cynomolgus 食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 熊果酸Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥85%,BR
THP-1 單核細(xì)胞細(xì)胞熊果酸;烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ursolic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CL-0418QGY-7703(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2香葉木素Diosmetin質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
Ethyl rutinoside
中文名:蕓香糖乙苷 分子式:C14H26O10 度:98.0% 兔子催乳素elisa試劑盒 兔子催乳素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子催乳素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
18-Hydroxytritriacontan-16-one 中文名: 分子式:C33H66O2 度:98.0% 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
粗球孢子菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Mannitol 中文名:甘露醇 分子式:C6H14O6 度:98.5% 兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Phomaligol A 中文名: 分子式:C14H20O6 度:% 兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
ucralose 中文名:三氯蔗糖 分子式:C12H19Cl3O8 度:99.0% 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝