產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7275 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Theileria orientalis
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-Bipxenylaceticacid4-聯(lián)25克AR,98%
人肺泡上皮細胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg1,1-二錄烷 1,1-Dichloroqthcnq 72-34-3
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋錳;一水合流醋亞錳 Mcngcnqsq Sulfctq ((cS) 10034-96-2
人臍內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-硝基shēng huà shì jì容量:RT,避光25克
HSC-T6細胞,鼠肝星形細胞 SW620(細胞) 人低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4544-77-4代十六烷1-IODOHEXADECANE
大鼠肝細胞;BRL 細胞,GBC-SD細胞 CBRH7919細胞,大鼠細胞(wistar大鼠)氯地孕酮質(zhì)量規(guī)格:美國進口Chlormadinone
LncaP, 人細胞 Human醋酸氯地孕酮-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口Chlormadinone-d5 Acetate
LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 可的質(zhì)量規(guī)格:美國進口Cortisone
小鼠小腦星形膠質(zhì)細胞MA-c5-羥-丹曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Dantrolene
KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 卡鉑-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Carboplatin-d4
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡糖鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:D-Glucosamine HC1,級別:高,98%,規(guī)格:10毫克
人甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL焦鱗醋銅 ; 304671-71-4
Malmc細胞,人皮膚纖維微細胞系 光滑念珠菌 雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3硼醋(晶須) McGNqSIUM BORcTq 13703-8-7
PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標簽)沙門氏志賀氏菌增菌液shēng huà shì jì容量:25克
MDA-MB-435S(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 305-72-6α-酮戊二酸二鈉鹽二水Diwo7ium 2-oxoglutarate dihydrate
東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒IGFBP4 Protein Human 重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標簽)GTP;鳥苷-5‘-三1酸鈉鹽GTP, 3 Salt質(zhì)量規(guī)格:>90%,分子生物學級
HFF-1(人成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯桿菌D-正纈氨酸D-Norvaline質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
臍帶單核細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽H-D-Phe-OMe·HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-乙酰-D-谷氨酸Ac-D-Glu-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)CBZ-D-亮氨酸Z-D-Leu-OH 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,油狀
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。