產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7222 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
嗜麥芽窄食單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:嗜麥芽窄食單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Stenotrophomonas maltophilia
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SCARB1 Others Human 人 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 朊病毒肽(106-126),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPrion Peptide (106-126),Human
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)前腎上腺髓質(zhì)素(1-20),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRProadrenomedullin (1-20)(human)
VIP Others Human 人 Vasoactive iestinal peptide / VIP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 前腎上腺髓質(zhì)素(45-92),人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRProadrenomedullin (45-92)(human)
小鼠Lewis瘤株;LLT蛋白激酶C(19-31)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRProtein Kinase C (19-31)
CCC-HPF-1細(xì)胞,人胚 小鼠腎系膜細(xì)胞,MC53細(xì)胞 CL-0098HCT-8(人盲腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2PLX4720質(zhì)量規(guī)格:>98%,B-RafV600E抑制劑PLX-4720
牛腎細(xì)胞;MDBK隱色孔雀石綠(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Leucomalachite Green
CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二十酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%(GC)Methyl Arachidate
CM-H132人小梁網(wǎng)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL反式玉米素質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)trans-Zeatin
IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氯亞鉑酸鉀 質(zhì)量規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度>99.95% Dipotassium tetrachloroplatinate
小鼠表皮色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)黃芪醇質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cycloastragenol
大鼠細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919]四乙基錄化shēng huà shì jì容量:5克
PGC Others Rat 大鼠 Pepsinogen C / PGC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二基 2,6-DiMqthylncphclqnq 281-4-0
B16瘤 色素瘤3-羥基本酸,英文名或英文縮寫:3-xy7noxybenzoic acid,級別:CP,99%,規(guī)格:50毫克
A549-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人細(xì)胞 A549-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells F-12K+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin對硝基本基-β-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量:RT25克
GDNF Protein Rat 重組大鼠 GDNF 蛋白 (His 標(biāo)簽)7440-69-9鉍BisMuth
嗜麥芽窄食單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒SW480 [SW-480]人腺癌細(xì)胞 SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBSβ-D-葡糖糖-6-1酸鈉鹽D-Glucose 6-phosphate salt 質(zhì)量規(guī)格:98%,美國進(jìn)口
CD40LG Protein Rat 重組大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖)Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)質(zhì)量規(guī)格:>97%,國產(chǎn)美侖
人羊膜上皮細(xì)胞(HAEpic)( 5×105 ) C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse葡萄糖氧化酶Glucose oxidase質(zhì)量規(guī)格:BR,>200U/mg
人癌細(xì)胞;MCF7溶菌酶(蛋清)Lysozyme,from egg white質(zhì)量規(guī)格:2萬U/mg,分子生物學(xué)級
人臍內(nèi)皮細(xì)胞(HVVEC)( 5×105 )HRP;辣根過氧化物酶Peroxidase, Horseradish(HRP)質(zhì)量規(guī)格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。