產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP7221 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
操作流程:
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:沃氏葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Staphylococcus warneri
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
沃氏葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
EAC(小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2wo7iummetxoxide甲氧基鈉1克BR,99%
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Lithium sulfate monohydrate,≥99.0% 10102-25-7 50G 通用試劑
人細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]GDX-501 GDX-501
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) CalciumPyruvate焦葡萄酸鈣50克BR,97%
人子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL54957-90-3鹽;inoneoline sulfate
牛陀螺狀細(xì)胞;BT 雞瘤細(xì)胞,DT40細(xì)胞 Kert-3細(xì)胞,小鼠細(xì)胞茚地那韋質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Indinavir
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM9403他唑巴坦,自由酸質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Tazobactam, Free acid
FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羧芐青霉素質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Carbenicillin
CL-0072Daudi(人瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2芬苯達(dá)唑砜質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Fenbendazole Sulfone
SDF2 Others Human 人 SDF2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 隱綠原酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cryptochlorogenic acid
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) D-乳酸脫氫酶1克保存:-20℃,避光
CL-0005293T(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×22,6-二本安;2-安基間二本;1-安基-2,6-二本;2-安基-1,3-二基本;連間二本安 2,6-DiMqthylcnilinq;2-cMino-1,3-diMqthylbqnzqnq;vic-M-Xylidinq;2,6-Xylidinq;2-cMino-M-xylqnq;1-cMino-2,6-diMqthylbqnzqnq 1987/6/7
KB/V細(xì)胞,人口腔上皮癌長(zhǎng)春新堿耐藥株 人內(nèi)皮細(xì)胞,EC-304細(xì)胞 大鼠細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3磺胺二5克2~8℃
BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2嶙酸三鈉100克
CN3 Others Human 人 CN3 / Coactin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 1921-70-6姥鮫烷PRISTANE
沃氏葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒小鼠瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1)阿莫西林鈉Amoxicillin 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) NBD-F;4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑NBD-F質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分
人癌細(xì)胞;MDA-MB-157魯米諾,發(fā)光氨luminol質(zhì)量規(guī)格:>98%
PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) BAEE;N-苯甲?;?/span>-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽BAEE質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
DU 145 人細(xì)胞ATEE;N-乙酰-L-酪氨酸乙酯N-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。