產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7204 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
斑石鯛虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:斑石鯛虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Spotted Knifejaw Iridovirus(SKIV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人正常上皮細(xì)胞;MCF 10AAmresco 進(jìn)分瓊脂粉質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分Agar
人肺動脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC) ( 5×105 )氟伏沙明質(zhì)量規(guī)格:>98%,油狀Fluvoxamine
CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2醋酸鋅(二水)質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%Zinc acetate
人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;M619 大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL舒巴坦鈉質(zhì)量規(guī)格:BR,>99%Sulbactam
H-4-II-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞9-溴芴(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)9-Bromofluorene
人表皮微內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 Human雷氏曼著色劑質(zhì)量規(guī)格:BSLeishman's stain
CM-H033人腸微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL來普霉素B 1%溶液質(zhì)量規(guī)格:>95%(HPLC),BCLeptomycin B 1% soluton
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸氟氫可的(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量97%-103%,標(biāo)準(zhǔn)品Fludrocortisone acetate
人平滑肌細(xì)胞HBVSMC醋酸氟氫可的質(zhì)量規(guī)格:>97%Fludrocortisone acetate
HEL細(xì)胞,人紅白細(xì)胞細(xì)胞 小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化),M-1細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acf阿折地平質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAzelnidipine
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6UREA尿素超級白色粉末RTsigma
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十五烷酸 Pentadecanoic acid,99% 1002-84-2 10G 通用試劑
T-103AI型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mLHE瓊脂 HqKTOqN qNTqRIC cGcR FOR
TU 686細(xì)胞,人細(xì)胞 人臍內(nèi)皮細(xì)胞,ECV-304細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-CALCIUMCHLORIDE,ANxy7noUS錄化鈣,無水ACS級白色精細(xì)片狀粉末RTsigma
C-33 A(人子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21079-66-9二本基錄化膦Chlorodipxenylphosphine
斑石鯛虹彩病毒探針法熒光定量PCR試劑盒3T3細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 COLO 205(細(xì)胞) 人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1(1S,4S)-N-去甲基鹽酸舍曲林(1S,4S)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)N-去甲基利福平N-Demethyl Rifampin質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
T-47D(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去甲基波生坦Desmethyl Bosentan質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人表皮色素細(xì)胞-淺色素HEM-l羥基去甲基波生坦Hydroxy Desmethyl Bosentan質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
CD22 Others Human 人 Siglec-2 / CD22 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 波生坦Bosentan質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。